文档介绍：通辽市医院检验科
微生物室作业指导书
营养琼脂配制
标准操作规程
文件编号:XX-JY-CZ-XJ-XXX
版本
生效日期:
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规范营养琼脂培养基配制的操作规程,保证培养基质量。
培养基含有氮源、碳源和微量无机盐。适宜细菌生长繁殖。
3用途
供细菌培养、菌株纯化及传种使用。
营养琼脂干粉28g、蒸馏水1000ml。
将28g营养琼脂干粉溶于1000ml蒸馏水中,混匀至完全溶解,分装,经121℃灭菌15分钟,冷藏备用。
6..储存条件
2~8℃冰箱。
实验室自行规定,确保培养基质量。
质控频度每次新配制时做质控。
质控方法及结果见表5-17
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微生物室作业指导书
营养琼脂配制
标准操作规程
文件编号:XX-JY-CZ-XJ-XXX
版本
生效日期:
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表5-17 配制营养琼脂培养基质控方法及结果
试验方法结果
无菌试验<100块抽检5%,>100块随机取10块,35℃培养24~48h 无细菌生长
生长试验 25923,35℃培养24~48h 菌落浅黄色
27853,35℃培养24~48h 菌落无色或浅绿色,直径>
平行试验做质控时,取新旧批号的培养基同时做
倾注时温度不易过高,否则冷凝水过多易污染;若温度过低,琼脂易凝固。
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微生物室作业指导书
血琼脂培养基配制
标准操作规程
文件编号:XX-JY-CZ-XJ-XXX
版本
生效日期:
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规范血琼脂培养基配制的操作规程,保证培养基质量。
2..原理
羊血或兔血等是细菌生长繁殖的良好营养物质。在45~50℃的基础培养基中加入血液可疑完好保存血液中某些布耐热的生长因子,同时血细胞不被破坏。%,可使血平皿在35℃培养18~24小时后色泽仍然鲜艳。
3用途
供一般病原菌的分离培养培养、溶血性鉴别及保存菌种用。
特殊蛋白胨23g、淀粉1g、***化钠5g.、琼脂10g、无菌脱纤维羊血(或兔血)5%~10%,ph ~。
将上述成分混匀,溶于1000ml蒸馏水中,加热溶化,校正ph,121℃高压灭菌15分钟。冷却至50℃加入无菌血液,充分摇匀后竞逐平板,待凝固后冷藏备用。血琼脂层厚4mm。
6..储存条件
2~8℃冰箱。
实验室自行规定,确保培养基质量。
质控频度每次新配制时做质控。
质控方法及结果见表5-18
表5-18 配制血琼脂培养基质控方法及结果
试验试验方法结果
无菌试验<100块抽检5%,>100块随机取10块,35℃培养18~24h 无细菌生长
生长试验 19615,35℃培养18~24h 生长良好,β溶血
6305,35℃培养18~24h 生长良好,α溶血
25923,35℃培养18~24h 生长良好,β溶血
大肠埃希菌 25922,35℃培养18~24h 生长良好
平行试验做质控时,取新旧批号的培养基同时做
平行
倾注时温度不易过高,否则血细胞易被破坏而溶血;若温度过低,琼脂易凝固。
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微生物室作业指导书
巧克力培养基配制
标准操作规程
文件编号:XX-JY-CZ-XJ-XXX
版本
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规范巧克力琼脂培养基配制操作规程,保证培养基质量。
2..原理
流感嗜血杆菌生长依赖血液中的X及V因子,当培养基加热至80~90℃时,可使血液中的红细胞破裂释放出X、V因子,以利于嗜血杆菌的生长培养。
3用途
主要用于嗜血杆菌的分录培养,亦可用于奈瑟菌的增殖培养。
牛肉浸出液1000ml、蛋白胨10g、***化钠5g.、琼脂15g、无菌脱纤维羊血100ml,ph ~。
将前4项成分混合,加热溶化,校正ph,121℃高压灭菌15分钟。冷却至80~85℃,以无菌技术加入羊血,摇匀后置至80~85℃水浴中,维持15分钟,使之成巧克力色取出,倾注平板,待凝固后冷藏备用。
6..储存条件
2~8℃冰箱。
实验室自行规定,确保培养基质量。
质控频度每次新配制时做质控。
质控方法及结果见表5-19
表5-19 配制巧克力琼脂培养基质量控制方法及结果
试验试验方法结果
无菌试验<100块抽检5%,>100块随机取10块,35℃,CO2培养24~48h 无细菌生长
生长试验