文档介绍：桂林理工大学密级:——克隆及表达分析凡纳滨对虾生长性状相关基因的硕士研究生学位论文专业:应用化学研究方向:应用生物技术研究生:高永华指导教师:李文兰副教授熊建华副研究员陈晓汉研究员论文起止日期:年轮月编号:至璺窒鱼
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保密期限为:即//年耭找恍拼以拢日导师签字:否么参签字日期挖生兰目旦签字日期:纱研究生学位论文独创性声明和版权使用授权书学位论文版权使用授权书年占月贓独创性声明本人声明:所呈交的论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。对论文的完成提供过帮助的有关人员已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本学位论文作者完全了解有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的印刷本和电子版本,允许论文被查阅和借阅。本人授权校梢越宦畚牡娜ú炕虿糠帜谌荼嗳胗泄厥菘饨屑焖鳎梢圆捎糜坝⑺跤或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》,并通过网络向社会公众提供信息服务。C艿学位论文在解密后适用本授权书本论文是否保密:是学位论文作者学位论文作者┳:签字日期;
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摘要凡纳滨对虾是养殖对虾三大主导品种之一,随着累代养殖及养殖环境不断恶化,现存在杂合度降低、遗传力减弱、抗逆性差、性状退化严重等不少令人堪忧的问题。为了建立对虾高生长品系或品种,本实验从分子生物学角度探讨凡纳滨对虾生长性状相关基因及表达情况,从而增强人们对数量性状遗传操纵能力,提高育种中对数量性状优良基材杀醵韵荷ば宰聪喙鼗騟罴跷目夤菇利用抑制差减杂交技术菇朔材杀醵韵荷ば宰吹南喙鼗虻膃减文库,筛选并克隆出对虾生长性状相关候选基因。经过两次差减杂交及二次应。然后扩增产物连接、转化、克隆、测序,根据斑点杂交的结果,获得霾钜毂达克隆,测序并搜索比对结果,获得慈觯渲鐾ü齆同源搜索有功能注释,为对虾中已知基因;个通过推测的氨基酸序列经过同源搜索到有功能注释的蛋白,为其他物种中已知基因:个仅在菘庵兴阉到同源蛄校7材杀醵韵褐械奈粗;颍个在数据库无同源序列,为新基因。对这些序列对应的基因进行进一步分析和功能研究,将为南美白对虾生长调控机理的研材杀醵韵合┐济富颉⒎核兀颂翘宓鞍虻目寺〖吧镄畔⒀Х治选取差减文库中的烯醇酶、,参照日本对虾的基因序列,进行序列延长拼接。经┰觥⒃靥蹇寺⒗栋装呱秆⒀粜约ḿ安序。克隆分别得到全长为基因,利用生物学软件对该两基因进行了序列比对、系统进化树、基因蛋白疏水性、亚细胞定位、二、三级空间结构等生物信息学分析。材杀醵韵合┐济浮⒎核兀颂翘宓鞍虻南喽远勘泶锓治根据凡纳滨对虾烯醇酶、,设计目的基因和内参管因在霾煌橹个不同生长期的相对表达情况。结果表明烯醇酶基因在肌肉组织及樟湎喽员泶锪孔罡撸核兀颂翘宓鞍蛟诩∪庾橹樟湎喽员因型选择的准确性和预见性,加速育种进程。究提供重要线索。,采用蘡‘计算方法,利用实时荧光定量际醴治隽交达量最高。关键词:凡纳滨对虾;生长性状;差减文库;基因克隆;相对定量表达桂林理工大学硕士学位论文
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录目摘要⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..第挛南鬃凼觥材杀醵韵鹤凼觥凡纳滨对虾分类学地位⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..凡纳滨对虾形态结构⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..我国目前凡纳滨对虾养殖形势⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯对虾育种研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.对虾分子生物学研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.罴跷目庾凼觥镄畔⒀У淖凼觥生物信息学的产生和定义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯生物信息学的主要研究内容⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.ü舛縁技术综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..疚难芯磕康暮鸵庖濉第路材杀醵韵荷ば宰聪喙睾蜓』虿罴跷目夤菇ā牧嫌敕椒ā匝槎铩试剂和仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..笛榉椒ā总闹票浮的分离与纯化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.目夤菇ā抑制差减杂交⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯目獠迦肫渭觳狻质粒提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.阳性克隆测序⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.桂林理工大学硕士学位论文
总雖柿考觳夥治觥致邸测序结果分析方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..峁敕治觥差减杂交二次Ч觳狻插入片段大小募觳狻阳性测序及序列分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯际跻G蟆际醯挠湃钡恪差减文库构建的意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.第路材杀醵韵合┐济富蚩寺∮肷镄畔⒀Х治觥牧嫌胧约痢试验动物⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.实