文档介绍：紫外可见分光光度法
2017/8/20
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概述
基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法称吸光光度法,它包括比色法和分光光度法。
紫外-可见分光光度法是研究物质在紫外、可见光区的分子吸收光谱的分析方法。它属于分子光谱法的一种,是利用某些物质的分子吸收200~800nm光谱区的辐射来进行分析测定的方法。
这种分子吸收光谱产生于价电子和分子轨道上的电子在电子能级间的跃迁,广泛用于无机和有机物质的定性、定量测定。
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当一束太阳光照射某一溶液时,太阳光中某一颜色的光被吸收,其互补色光透过溶液,刺激人的眼睛,使人感觉到它的颜色。
溶液颜色与光吸收的关系
可见光波长及其互补光
实例:
1)高锰酸钾吸收绿光显紫红色;
2)***钾吸收蓝光显黄色;
3)邻菲罗啉铁溶液吸收蓝绿光显红色。
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完全吸收
完全透过
吸收黄色光
光谱示意
表观现象示意
复合光
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根据溶液的颜色,可以估计该溶液吸收的光的波长。
/nm
颜色
互补色
400-450
紫
黄绿
450-480
蓝
黄
480-490
绿蓝
橙
490-500
蓝绿
红
500-560
绿
红紫
560-580
黄绿
紫
580-610
黄
蓝
610-650
橙
绿蓝
650-760
红
蓝绿
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分光光度法的发展过程
分光光度法在发展过程中先后经过了目视比色法,光电比色法和分光光度法三个阶段。
(1)目视比色法是一种用眼睛辨别颜色深浅,以确定待测组分含量的方法。
(2)光电比色法是使用光电比色计测量溶液吸光度并计算待测组分含量。
(3)分光光度法是应用分光光度计,通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸光度,对该物质进行定性、定量分析的方法。它包括紫外分光光度法、可见光分光光度法、红外分光光度法等。
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测量每一波长下有色溶液对光的吸收程度(即吸光度A),然后以波长为横坐标,吸光度为纵坐标作图,得到一条曲线,称为吸收光谱曲线(简称吸收曲线)。
吸收光谱示意图
吸收曲线及常用术语
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透过光的强度 It与入射光的强度I0之比称为透光度,用 T表示。常用百分数表示:
T = It / I0
为了表示物质对光的吸收程度,常采用吸光度A这一概念,即透光度倒数的对数值。
A = lg(I0 / It)= lg(1 / T)= -lg T
和吸光度A
朗伯—比耳定律
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—比耳定律
布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于1729年和1760年阐明了光的吸收程度和吸收层厚度的关系。
A∝b
1852年比耳(Beer)又提出了光的吸收程度和吸收物浓度之间也具有类似的关系。
A∝c
二者的结合称为朗伯—比耳定律,其数学表达式为:
A = εb c
朗伯—比耳定律是吸光光度法的理论基础和定量测定的依据。
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A= εb c
式中A:吸光度;描述溶液对光的吸收程度;
b:液层厚度(光程长度),通常以cm为单位;
c:溶液的摩尔浓度,单位mol·L-1;
ε:摩尔吸收系数,单位L·mol -1·cm-1。(讲解78页例题)
摩尔吸收系数越大表明该物质的吸光能力越强,用光度法测定该物质的灵敏度越高。
ε> 105:超高灵敏;
ε= (6~10)×104 :高灵敏;
ε< 2×104 :不灵敏。
摩尔吸收系数
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