文档介绍：中国农业大学
硕士学位论文
传染性法氏囊病病毒单克隆抗体的制备及特性研究
姓名:汪波莉
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:张曼夫
关键词:传染性法嗲病病毒,单克粤抗体咕唤冢中文摘要毒和疫苗株不结合,因此可用作区别感染野毒和疫苗株,胰绻怯肫渌建立的鼓苡糜诩μ迥谀冈纯固逅降牟舛ā∥的单克隆抗体。用单抗甄类试剂盒鉴定,发现它们都属于亚类,供细胞培养,传染性法氏囊病俏:ρ菀档囊恢种匾4拘圆《炯膊 F洳≡淮拘相关数据缺乏可比性,而溶文中采用了一种灵敏、可靠、重复性好的方法测定了国内两株的毒力,结果表明它们都属于。/这种方法的优点在于它利用灵敏的双抗夹心⒈湟熘辍⑾赴视Χ竞鸵呙缰曛浯嬖诿飨缘目乖坏悴钜欤醪浇沂玖宋夜扩染色体数日分别为,,通过与其它禽类病毒的交叉实验证明,分前牧餍凶纯觯=窈筇岢龊侠淼姆酪叽胧┨峁┝死砺垡谰荨“目前国际国内尚无统一的判定毒株毒力的标准,不同地区不同实验室的依据不一致,椒ɡ磁卸霞ε叩母腥拘裕芄豢朔鞴鄄±砼卸匣岢鱿治蟛畹娜钡悖佣既返根据鸡的死亡率则可判定毒株毒力的强弱。毒力测定的标准化方法的建立为的其它在测定所需制备单抗的毒株的毒力基础之上,利用细胞杂交瘤技术,制备出五株抗上清和腹水效价都可分别达到.×鹾:陨稀N逯暝咏涣鱿赴钠骄泌的抗体均具有高度的特异性。用五株纯化后的腹水单抗与蛋白进行〖#原上相同的表位。⑾由于本文中所制备的单抗可广谱地与当前国内流行的相结合,而与细胞适应法氏囊病病毒属于双链双节段《究,它主要感染幼鸡的免疫器官法氏囊中正在分化成熟的馨拖赴N夜鶬的分子流行病学研究表明,传染性法氏囊病病毒超强毒在我国已经普遍流行,变异株也有报道,醮思忧慷訧毒力增强以及抗原变异的分子基础研究,从而提出合理的防疫措施是非常必要的,本研究的工作就是围绕这两个内容展开的。计算出样品中的病毒含量,然后用标准剂量×腎許鸡和商品鸡攻毒,研究奠定了工作基础。。发现它们都是针对目固澹有訣实验结果表明,五株单抗可能识别的是病毒抗抗结合使用,既可以达到病原快速诊断的目的,又能同时鉴别毒株的特性。此外,用单抗\/并,’
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传染性法氏囊病病毒超强毒传染性喉气管炎病毒减蛋综和症病病毒二硫苏糖醇二甲基亚砜病毒中和实验传染性法氏囊病病毒传染性支气管炎病毒禽流感病毒鸡新城疫病毒开放阅读框架鸡胚半数感染量细牧糆培养基氨基喋吟,’.一撬十二烷基硫酸钠郾D旱缬三羟甲基氨基甲烷琋,疦’.四甲基乙二胺二氨基联苯胺单克隆抗体酶联免疫吸附测定抗原捕获酶联免疫吸附测定鸡胚成纤维细胞传染性法氏囊病病毒蛋白细胞病变非编码区无特异病原的牛血清白蛋白乙二胺四乙酸聚乙二醇磷酸盐缓冲液辣根过氧化物酶四甲基联苯胺千道尔顿—.%痵—·琋,琋’一疢痬畁—
氨基酸微克微升双蒸水
塞堂箜堕——文献综述拘苑ㄊ夏也〖捌洳≡匦。闣和成功地分离到病原,并称之“鸡传染性法氏囊因子”迅速康复。由于唤隹芍苯右鹨赘械募Υ笈劳觯挂蛭F洳≡趾Φ氖羌Φ闹惺..晔澜缜莶』嵋樯希貌”徽矫饕7⑸.周龄的雏鸡和青年鸡,而芰湟韵碌某Ω腥竞蟛槐硐至俅仓免疫器官法氏囊,破坏法氏囊中正在分化成熟的馨拖赴.。佣辜θ憾远嘀旨膊〉囊赘行栽龈.。斐删薮缶盟鹗В訧被视为危害养鸡业的最主要三大属于双链双节段执病毒科是单层衣壳结构,无囊膜,成二十面体对称结构,直径约琺个颗粒基因组由两个节段的双链槌桑两迪凳,在中的浮密度为/鸡传染性法氏囊病虺艻怯纱拘苑ㄊ夏也〔《虺艻起的鸡和火鸡的一种急性、高度接触性传染病。年在美国特拉华州的甘布罗厍状畏⑾諭的发生,,其病原被称为传染性法氏囊病病毒。状.,⒉〉募癯劣簟⒂鹈媪ⅰ⑾铝⒄鸩⒐济失调。该病区别于其它传染性疾病的明显特点是突然发生,感染率高,尖峰死亡曲线和,引起免疫抑锘疫病之一胖兄钡龋。,该病毒科还包括鱼的传染性胰坏死病毒、红贝病毒和龙虾病毒以及果蝇的《,它们的共同特征是基因组为双链,分为两个节段。组成..茉诙嘀侄锵赴性鲋常⑹垢腥鞠赴±肀浠。..对多种理化因子的抵抗力比一般病毒要强:它具有较强的耐热性,在纱婊贘存活分钟,·下至少刈存活.,;.,:.;
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