实验一 凝集试验课件.ppt

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目的要求:
1、掌握玻片凝集试验和试管凝集试验
的操作技术。
2、掌握凝集反应中阴阳性结果的判定。
凝集试验:
抗原与相应抗体结合,在电解质存在下,经
过一定时间,形成肉眼可见的凝集团块,称
为凝集试验(agglutinationtest,agg)
反应中的
抗原——凝集原
抗体——凝集素
一、直接凝集试验
细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合并出现凝集现象称直接凝集试验(directagglutinationtest)。
按操作方法分玻片法和试管法两种。
(一)试管凝集试验
实验材料:
1、布氏杆菌试管凝集抗原
由兽医生物药品厂生产供应。该抗原为布氏杆菌死菌混悬液,每1ml约含菌100亿。是将牛型、羊型、猪型三型布氏杆菌的培养物杀死,%的石炭酸生理盐水中制成。静置时上层清亮无色或略呈灰白色,瓶底有菌体沉淀。用时需充分摇匀,%的石炭酸生理盐水按规定倍数稀释(1:20)。
2、布氏杆菌病待检血清
从被检动物采取。被检血清必须新鲜、无
明显蛋白凝块、无溶血现象和腐败气味,
采血后不得迟于2~3d检验。否则需加防
腐剂或冰冻保存。
实验方法与步骤:
(一)布氏杆菌试管凝集试验
按下表术式加样操作。
加样:
①每份血清用4支试管,另取对照试管3支,置
试管架上。
②%石炭酸生理盐水。
③,加入第1管
中,充分混匀,,
加入第2管,,依
此类推至第4管,。
④第6管中加1:
⑤第7管中加1:
⑥%石炭酸生理盐水稀释20倍的
。
结果记录:
﹟:液体完全透明,菌体完全被凝集呈伞状沉于
管底,振荡时,沉淀物呈片状、块状或颗粒
状(即100%的菌体被凝集)
+++液体略呈混浊,菌体大部分被凝集沉于管
底,振荡时情况如上(75%菌体被凝集)。
++液体不甚透明,管底有明显的凝集沉淀,振
荡时有块状或小片絮状物(50%凝集)
+液体透明度不明显或不透明,有不甚显著的
沉淀或仅有沉淀的痕迹(25%菌体被凝集)
-:液体不透明,管底无凝集,有时管底可见有
一部分沉淀,但振荡后立即散开呈均匀混匀