文档介绍:学位论文作者签名:芽最雄学位论文作者签名:柬予报鲁奕,独创性声明签宁口期:驯学位论文版权使用授权书签字口期:矽研年多月篷口特别加以标注和致谢之处外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,。与我一同工作的同志对木研究所做的任本学位论文作者完全了解兰捌交通太堂有关保留、使用学位论文的规定。特授权兰捌銮通太堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,并采用影印、缩印或扫描等复制手本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作和取得的研究成果,除了文中何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。段保存、汇编以供奄阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文的复痛排獭C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄋ得导师签名:签宁几期:
㈣甘肃省冬虫夏草遗传多样性分析和人工培养条件的研究苓凇㈣硕士学位论文学科、专业:作者姓名:学兰州交通大学
摘要冬虫夏草是我国一种药食兼用的传统名贵中药材,现代研究证实具有重要的药用价值。甘肃省是我国冬虫夏草的主要产地之一。为调查甘肃省三个主要产区所产冬虫夏草种类的系统发育及遗传分化,本研究开展了以甘肃省几个冬虫夏草主产区的虫草资源进行分子系统学分析和相关研究。主要研究结果如下:狙芯看永醋愿仕嗳鲋饕2杉亩嫦牟萆戏掷氲鼍辏秆〕鲎佳培养基,研究其对温度的适应性,低温下生长较慢,℃为最适生长温度,℃及其以上不能生长,并首次通过在培养基中斜插盖玻片的方法在光学显微镜下清晰观察菌丝和分生孢子形态;通过特殊培养在三角瓶中长出与野生冬虫夏草“草头”相同的子实体。从形态学上判定分离的菌株为中国被毛孢。捎酶慕腃ǘ跃昊蜃镈进行提取。经紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳检测分析。方法是,在提取缓冲液中加入蚿一巯基乙醇,同时采用一平衡饱和酚/氯仿/异戊醇,氯仿/异戊醇相结合的抽提法,通过加入/,经冰冻无水乙醇沉降和%乙醇多次洗涤。结果显示,经改良后的法提取的基因组瓮暾⒋慷雀摺⒅柿亢寐愫笮笛橐G蟆ü呕疘从μ逑凳状稳范硕嫦牟..从μ逑滴:模板;/籌物酆厦.。捎眉虻バ蛄欣馗淅┰龆嗵苑治龊序列分析法,对个菌株进行标记和系统发育分析。在分析中显示出不同地域的样本间遗传分化较大,遗传多样性较丰富:同一地域不同地点间样本存在遗传分化:同一地点样本间存在较小遗传分化;分离白同一株虫草七的菌株之间不存在遗传分化。存系统发育分析中显示出在同一地域不同地点样本间和同一地点不同样本间具有较小的遗传分化;分离全同一株虫草上刁课坏木嬖谝糯ǚ只ü齈技术扩增出个菌株间糠中蛄校ü庑蚍治觥=峁允序列长P蛄斜榷苑⑾郑鞣掷胛镉胫泄幻间仅有个碱基的差异,相似性高达%,遗传距离存韵隆K得鼍暧畇舜思湓诨蛩缴鲜歉叨纫恢碌摹NA私徊奖冉戏掷刖晡扌孕陀胫泄被毛孢之间的关系,以蛹虫草颓蜴呔外群,并与同源性相关的菌物构建分子系统树,结果显示个分离菌株的无性型为中国被毛孢。状尾捎帽椒右涣蛩岱ú舛ㄖ泄幻呔刻宥嗵呛浚叩馑崮票壬ǚú舛ǜ露醇含量,反相高效液相色谱法测定腺苷和虫草素含量。结果表明,天然冬虫夏草中存/籑兰州交通大学硕士学位论文疞:
在虫草素且在甘肃不同产区分离得到的虫草菌多糖含量在~ブ洌事洞含量在ァ.%之间,、~/煌徊煌胤椒掷氲降某娌菥嗵呛吭.%~ブ洌甘露醇含量在ァ.%之间,虫草素和腺苷的含量分别在..肛痝、..痝。通过显著性分析说明不同产地菌株间的活性成分含量差异显著;同一产区菌株间除腺苷外活性成分含量差异不显著。从多糖含量和腺苷含量上可以看出从甘南冬虫夏草上分离得到的菌株较优亦说明甘南虫草质量最好。同时说明在甘南产区中以加仓虫草质量最优。关键词:冬虫夏草;遗传分化;活性成分论文类型:基础研究兰州交通大学硕士学位论文
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