文档介绍：该【生物选修一知识点 】是由【2112770869】上传分享，文档一共【18】页，该文档可以免费在线阅读，需要了解更多关于【生物选修一知识点 】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。第1页
生物选修1知识点
专题1 传统发酵技术的应用
课题1 果酒和果醋的制作
课题2 腐乳的制作
课题3 制作泡菜并检测亚***盐含量
专题2 微生物的培育与应用
课题1 微生物的试验室培育
课题2 土壤中分解尿素的细菌的别离与计数
课题3 分解纤维素的微生物的别离
专题3 植物的组织培育技术
课题1 菊花的组织培育
课题2 月季的花药培育
专题4 酶的探讨与应用
课题1 果胶酶在果汁生产中的作用
课题2 探讨加酶洗衣粉的洗涤效果
课题3 酵母细胞的固定化
专题5 DNA和蛋白质技术
课题1 DNA的粗提取与鉴定
课题2 多聚酶链式反响扩增DN***段
第2页
课题3 血红蛋白的提取和别离
专题6 植物有效成分的提取
课题1 植物芳香油的提取
课题2 胡萝卜素的提取
附录1 生物学试验室的根本平安规那么
附录2 生物学试验室中常用的国际单位
附录3 常用培育基配方
附录4 常用的消毒灭菌操作方法
附录5 常用化学抑菌剂
课题1果酒和果醋的制作
一,试验原理
酶
酶
酵母菌进展有氧呼吸大量繁殖,表达式为:C6H12O6+O2→CO2+H2O+能量
酵母菌进展无氧呼吸产生酒精和二氧化碳,表达式为:C6H12O6→C2H5OH+CO2+能量
酵母菌在有氧和无氧的条件下都能生活:在有氧时,酵母菌大量繁殖,但是不起到发酵效果;在无氧时,繁殖速度减慢,但是此时可以进展发酵。在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖,再隔绝氧气进展发酵。20℃左右最适合酵母菌繁殖,酒精发酵的最正确温度是在18℃~25℃,pH最好是弱酸性。
酶
,当缺少糖源时和有氧条件下,可将乙醇〔酒精〕氧化成醋酸。表达式为:C2H5OH→CH3COOH+H2O;当氧气,糖源都足够时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。
醋酸菌生长的最正确温度是在30℃~35℃
二,试验步骤
,纱布,榨汁机,盛葡萄汁的器皿等试验用具进展清洗并消毒。先用温水反复冲洗几次,再用体积分数为75%的酒精擦拭消毒,晾干待用。
,去除枝梗和腐烂的子粒。
~2遍除去污物,留意不要反复屡次冲洗。
第4页
,将其装入发酵瓶中或将葡萄打成浆后,用干净的纱布过滤至发酵瓶中,盖好瓶盖。假如没有相宜的发酵装置,可以用500mL的塑料瓶替代,但注入的果汁量不要超过塑料瓶总体积的2/3。
。
,因此须要及时排气,防止发酵瓶爆裂。假如运用简易的发酵装置,如瓶子〔最好选用塑料瓶〕,每天要拧松瓶盖2~4次,进展排气。
,可以开场进展取样检验工作。例如,可以检验酒味,酒精的含量,进展酵母菌的镜检等工作。
,可以在发酵液中参与醋酸菌或醋曲,然后将装置转移至30~35℃的条件下发酵,适时向发酵液中充气。假如找不到醋酸菌菌种或醋曲,可尝试自然接种,但效果不是很好。假如没有充气装置,可以将瓶盖翻开,在瓶口盖上纱布,以减少空气中尘土等的污染。
三,考前须知
请分析此装置中的充气口,排气口和出料口分别有哪些作用。为什么排气口要通过一个长而弯曲的胶管及瓶身连接?结合果酒,果醋的制作原理,你认为应当如何运用这个发酵装置?
充气口排气口
出料口
答:充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进展充气用的;排气口是在酒精发酵时用来排出CO2的;出料口是用来取样的。排气口要通过一个长而弯曲的胶管及瓶身连接,其目的是防止空气中微生物的污染。运用该装置制酒时,应当关闭充气口;制醋时,应将充气口连接气泵,输入氧气。
课题2腐乳的制作
试验原理
,酵母,曲霉,毛霉等多种,其中起主要作用的是毛霉。
,常见于土壤,水果,蔬菜,谷物上,具有兴盛的白色菌丝。
蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
二,试验步骤
×3cm×1cm的假设干块。所用豆腐的含水量为70%左右,水分过多那么腐乳不易成形。
,粽叶可以供应菌种,并能起到保温的作用。每块豆腐等距离排放,四周留有肯定的空隙。豆腐上面再铺上干净的粽叶。气候枯燥时,将平盘用
第5页
保鲜膜包袱,但不要封严,以免湿度太高,不利于毛霉的生长15~18 ℃的地方。毛霉渐渐生长,大约5 d后豆腐外表丛生着直立菌丝。
,并呈淡黄色时,去除包袱平盘的保鲜膜以及铺在上面的粽叶,使豆腐块的热量和水分能够快速散失,同时散去霉味。这一过程一般持续36 h以上。
,将豆腐间连接在一起的菌丝拉断,并整齐排列在容器内,打算腌制。
〔以下称毛坯〕及盐的质量分数比为5∶1。将培育毛坯时靠***盘没长直立菌丝的一面统一朝向玻璃瓶边,将毛坯分层盘立摆放在容器中。分层加盐,并随层加高而增加盐量,在瓶口外表铺盐厚些,以防止杂菌从瓶口进入。约腌制8 d。
〔注〕用盐腌制时,留意盐都用量。盐的浓度过低,缺乏以抑制微生物生长,可能导致豆腐***变质;盐的浓度过高,会影响腐乳的口味。,米酒和糖,按口味不同而配以各种香辛料〔如胡椒,花椒,八角茴香,桂皮,姜,辣椒等〕混合制成卤汤。卤汤酒精含量限制在12%左右为宜。
〔注〕酒精含量的上下及腐乳后期发酵时间的长短有很大关系。酒精含量越高,对蛋白酶的抑制作用也越大,使腐乳成熟期延长;酒精含量过低,蛋白酶的活性高,加快蛋白质的水解,杂菌繁殖快,豆腐易***,难以成块。,用高压锅在100 ℃蒸汽灭菌30 min。将腐乳咸坯摆入瓶中,参与卤汤和辅料后,将瓶口用酒精灯加热灭菌,用胶条密封。在常温状况下,一般六个月可以成熟。
三,考前须知
前期发酵和后期发酵。前期发酵所发生的主要变化是毛霉在豆腐〔白坯〕上的生长。发酵的温度为15~18 ℃,此温度不适于细菌,酵母菌和曲霉的生长,而适于毛霉渐渐生长。毛霉生长大约5 d后使白坯变成毛坯。前期发酵的作用,一是使豆腐外表有一层菌膜包住,形成腐乳的“体〞;二是毛霉分泌以蛋白酶为主的各种酶,有利于豆腐所含有的蛋白质水解为各种氨基酸。后期发酵主要是酶及微生物协同参及生化反响的过程。通过腌制并配入各种辅料〔红曲,面曲,酒酿〕,使蛋白酶作用缓慢,促进其他生化反响,生成腐乳的香气。
低等丝状真菌,有多个细胞核,进展无性繁殖。毛霉是食品加工业中的重要微生物,它可以产生能够分解大豆蛋白的蛋白酶,常用于制作腐乳和豆豉。
课题3探讨加酶洗衣粉的洗剂效果
一,试验原理
,目前常用的酶制剂有四类:蛋白酶,脂肪酶,淀粉酶和纤维素酶,其中,应用最广泛
第6页
,效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。
,奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污迹从衣物上脱落。脂肪酶,淀粉酶和纤维素酶也能分别将大分子的脂肪,淀粉和纤维素水解为小分子物质,使洗衣粉具有更好的去污实力。
,我们主要探究有关加酶洗衣粉的三个问题:一是一般洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的洗涤效果有什么不同;二是在什么温度下运用加酶洗衣粉效果最好,三是添加不同种类的酶的的洗衣粉,其洗剂效果有哪些区分。
二,试验步骤
1探究用加酶洗衣粉及一般洗衣粉洗涤的效果的不同
①在2个编号的烧杯里,分别注入500mL清水。②取2块大小相等的白棉布,用滴管在每块白布上分别滴上等量的墨水,分别放入烧杯里,用玻璃棒搅拌。③将2个烧杯分别放入同等温度的温水中,保温5分钟。④称取5克加酶洗衣粉和5克一般洗衣粉2份,分别放入2个烧杯中,用玻璃棒匀称搅拌。保温10分钟。⑤视察并记录2个烧杯中的洗涤效果
2探究用加酶洗衣粉洗涤的最正确温度条件
①在3个编号的烧杯里,分别注入500mL清水。②取3块大小相等的白棉布,用滴管在每块白布上分别滴上一滴食用油,鸡血,牛奶,分别放入烧杯里,用玻璃棒搅拌。③将3个烧杯分别放入50摄氏度的热水,沸水和冰块中,保温5分钟。④称取5克加酶洗衣粉3份,分别放入3个烧杯中,用玻璃棒匀称搅拌。保温10分钟。⑤视察并记录3个烧杯中的洗涤效果。3探究不同种类的加酶洗衣粉洗涤的效果
污染物
蛋白酶洗衣粉
脂肪酶洗衣粉
复合酶洗衣粉
一般洗衣粉
油渍
汗渍
血渍
视察并记录四种洗衣粉分别洗涤三种污染的洗涤效果。三,考前须知
影响加酶洗衣粉洗涤效果的因素有水温,水量,水质,洗衣粉的用量,衣物的质料,大小及浸泡时间和洗涤的时间等。在这些因素中,水温是我们要探讨的对象,而其他因素应在试验中保持不变。选择什么样的水温进展试验须要试验者依据当地一年中的实际气温变化来确定水温,通常状况下,冬季,春季,秋季和夏季可分别选取5℃,15℃,25℃和35℃的水温,因为这4个水温是比拟符合实际状况的,对现实也有指导意义。
第7页
。
在洗涤方式中有机洗和手洗两种方式,应考虑其中哪一种比拟科学?哪一种更有利于限制变量?再有,洗衣机又可以分为半自动和全自动两种,相比之下,采纳全自动洗衣机比拟好,并且应当尽量运用同一型号小容量的洗衣机,其机械搅拌作用一样。关于洗涤材料的选择也有一些讲究。用衣物作试验材料并不志向,这是因为作为试验材料的衣物,其大小,颜色,干净程度等应当完全一样,而这并不简单做到;此外,人为地在衣物上增加污物,如血渍,油渍等,也令人难以承受。因此,选用布料作为试验材料比拟可行。在作比照试验时,可以限制布料的大小,颜色以及污物的量,使其一样;同时,也便于洗涤效果的比拟。
,水质和洗衣粉用量的问题。
水的用量和布料的大小是成正比的。做试验用的布料不易过大,水量不易过多,但应当让布料充分浸泡在水中。水量和洗衣粉的用量可以参考下表。试验时可依据表中的数据换算出实际用量。假如在试验中运用手洗的方法,如课本中图4-4所示,运用1000mL的烧杯作为容器,可以用500mL的水,。
洗涤方式
机洗
手洗
水量
洗衣粉量
其他相关问题简述如下。试验中可以用滴管限制污物的量,待污物枯燥后再进展试验;布料应放在洗衣粉溶液中浸泡一样的时间;采纳玻璃棒或筷子搅拌的方式模拟洗衣过程;模拟搅拌的时间,次数和力气应根本一样。
课题4酵母细胞的固定化
一,试验原理
,将这种酶固定在一种颗粒状的载体上,再将这些酶颗粒装到一个反响柱内,柱子底端装上分布着很多小孔的筛板。酶颗粒无法通过筛板的小孔,而反响溶液却可以自由出入。生产过程中,将葡萄糖溶液从反响柱的上端注入,使葡萄糖溶液流过反响柱,及固定化葡萄糖异构酶接触,转化成果糖,从反响柱的下端流出。反响柱能连续运用半年,大大降低了生产本钱,提高了果糖的产量和质量。
,包括包埋法,化学结合法和物理吸附法。一般来说,酶更适合采纳化学结合法和物理吸附法固定,而细胞多采纳包埋法固定化。这是因为细胞个大,而酶分子很小;个大的难以被吸附或结合,而
第7页
个小的酶简单从包埋材料中漏出。
固定化酶优点:使酶既能及反响物接触,又能及产物别离,还可以被反复利用。
固定化细胞优点:本钱更低,操作更简单,可以催化一系列的化学反响。
二,试验步骤
1。细胞的活化
称取lg干酵母,放入50mL的小烧杯中,加人蒸馏水10mL,用玻璃棒搅拌,使酵母细胞混合匀称,成糊状,放置1h左右,使其活化。
【注】活化:让处于休眠状态的微生物重新复原正常的生活状态
。放人200mL的烧杯中,参与150mL的蒸馏水,使其充分溶解,待用。3。,放入50mL小烧杯中。加人10mL水,用酒精灯加热,边加热边搅拌,将海藻酸钠调成糊状,直至完全溶化,用蒸馏水定容至10mL。留意,加热时要用小火,或者连续加热,反复几次,直到海藻酸钠溶化为止。4。海藻酸钠溶液及酵母细胞混合将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温,加人已活化的醉母细胞,进展充分搅拌,使其混合匀称,再转移至注射器中。
【注】冷却至室温的目的:防止杀死酵母菌
5。固定化酵母细胞
以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中,视察液滴在CaCl2溶液中形成凝胶珠的情形。将这些凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30min左右。
【注】CaCl2溶液的作用:使胶体聚沉
6运用固定化酵母细胞发酵
a)将固定好的酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗2-3次。
b)将150mL质量分数为10%的葡萄糖溶液转移到200mL的锥形瓶中,再参与固定好的
酵母细胞,置于25℃下发酵24h。三,考前须知
:小火,连续加热,定容,假如加热太快,海藻酸钠会发生焦糊。
:冷却后再混合,留意混合匀称,不要进入气泡
:高度相宜,并匀速滴入
,以便Ca2+及Na+充分交换,形成的凝胶珠稳定。检验凝胶珠是否形成,可用以下方法:用镊子夹起一个凝胶珠放在试验桌上用手挤压,假如不简单裂开,没有液体流出就说明胜利地制成了凝胶珠,还可以用手将凝胶珠在
第8页
试验桌上用力摔打,假如凝胶珠很简单弹起,也说明制备的凝胶珠是胜利的。
假如制作的凝胶珠颜色过浅,呈白色,说明海藻酸钠的浓度偏低,固定的酵母细胞数目较少;假如形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,那么说明海藻酸钠的浓度偏高,制作失败,须要再作尝试。
课题5DNA的粗提取及鉴定
一,试验原理
提取生物大分子的根本思路是选用肯定的物理或化学方法别离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于DNA的粗提取而言,就是要利用DNA及RNA,蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以到达别离目的。
此外,DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质那么溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA及蛋白质进一步的别离。
,高温柔洗涤剂的耐受性
蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60—80oC的高温,而DNA在80oC以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。
在沸水浴条件下,DNA遇二苯***会被染成蓝色,因此二苯***可以作为鉴定DNA的试剂。
二,试验设计
试验材料的选取
但凡含有DNA的生物材料都可以考虑,但是运用DNA含量相对较高的生物组织,胜利的可能性更大。
裂开细胞,获得含DNA的滤液
动物细胞的裂开比拟简单,以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中参与肯定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可。假如试验材料是植物细胞,须要先用洗涤剂溶解细胞膜。例如,提取洋葱的DNA时,在切碎的洋葱中参与肯定的洗涤剂和食盐,进展充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。
留意:
①为什么参与蒸馏水能使鸡血细胞裂开?
蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞胀裂,再加上搅拌的机械作用,就加速了鸡血细胞的裂开(细胞膜和核膜的裂开),从而释放出DNA。
第10页
②参与洗涤剂和食盐的作用分别是什么?
洗涤剂是一些离子去污剂,能溶解细胞膜,有利于DNA的释放;食盐的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解。
③假如研磨不充分,会对试验结果产生怎样的影响
研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全,提取的DNA量变少,影响试验结果,导致看不到丝状沉淀物,用二苯***鉴定不显示蓝色等。
④此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分?
可能含有核蛋白,多糖和RNA等杂质。
去除滤液中的杂质
方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质,不分解DNA;方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同。
留意:
①为什么反复地溶解及析出DNA,能够去除杂质?
用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此,通过反复溶解及析出DNA,就能够除去及DNA溶解度不同的多种杂质。
②方案二及方案三的原理有什么不同?
方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的DNA及蛋白质分开;方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同,从而使蛋白质变性,及DNA别离。
DNA的析出及鉴定
将处理后的溶液过滤,参与及滤液体积相等,冷却的酒精溶液,静置2~3min,溶液中会出现白色丝状物,这就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面的水分。
取两支20ml的试管,各参与物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5ml,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各参与4ml的二苯***试剂。混合匀称后,将试管置于沸水中加热5min,待试管冷却后,比拟两支试管溶液颜色的变化,看看溶解有DNA的溶液是否变蓝。
三,试验步骤—以洋葱为试验材料
,放入研钵中,参与少量石英砂助研,倒入10mL2mol/L的***化钠溶液,充分研磨。
洋葱含有挥发性刺激物,有效减少刺激,才能使试验顺当进展。上课前,老师可先将洋葱放入冰箱冷冻一会儿,使其凉透但又不能结冰;或将洋葱切成几大块,放入清水泡一会儿,让其挥发性刺激物溶于水,可以减轻刺激。然后将洋葱切碎备用。研磨的目的主要是使洋葱细胞裂开,使DNA溶于2mol/L的***化钠溶液,没必要将洋葱研成粥糊状,后者既奢侈时间又影响
第10页
试验效果。研磨时,切忌运用搅拌器〔榨汁机〕。运用搅拌器虽可以提高研磨效率,但搅拌器将洋葱切成极细小的颗粒,无法通过过滤将洋葱颗粒剔除。只能将酒精直接倒入滤液中,很多洋葱小颗粒因为轻会漂浮起来,DNA藏在其中,无法辨别。学生看不到白色纤维状粘稠物的DNA。
,用漏斗和纱布将汁液过滤到小烧杯中,得到滤液。
%的酒精溶液20mL,沿烧杯壁缓缓倒入,不要振动或搅拌。
此时,烧杯中的液体分为上,下两层,下层较浑浊,上层澄清,很快上层溶液中就会有白色纤维状粘稠物析出,用玻璃棒可将其轻轻卷起。这就是记录生命遗传信息的重要物质——DNA。DNA析出的过程中,切忌振动和搅拌〔不振动易于分层,我们就能很简单视察到上清液中的丝状物;搅拌会使特别松软的DNA断裂成小段,不易取出〕。假如用玻璃棒DNA不易卷起,可改用外表打毛的牙签,DNA提取物就缠绕在牙签上了。
:取两支试管,编为1,2号,各参与2mol/L的***化钠溶液2mL,向1号试管中参与一些白色纤维状物,振荡使其溶解,然后向两支试管中各参与2mL二苯***试剂,沸水浴加热5分钟。
四,考前须知
,每100ml血液中须要参与3g柠檬酸钠防止血液凝固。
,动作要轻缓,柔软,否那么简单产生大量的泡沫,不利于后续步骤地操作。参与酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以免DNA分子的断裂,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。
***试剂要现配现用,否那么会影响鉴定的效果。
:
,随浓度的上升,DNA的溶解度降低;,随浓度上升,DNA的溶解度上升。
,最好是塑料容器。
鸡血细胞裂开以后释放出的DNA,简单被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量原来就比拟少,再被玻璃容器吸附去一局部,提取到的DNA就会更少。因此,试验过程中最好运用塑料的烧杯和试管,这样可以减少提取过程的DNA的损失。
课题6血红蛋白的提取和别离
一,试验原理
蛋白质的物化理性质:形态,大小,电荷性质和多少,溶解度,吸附性质,亲和力等千差万别,由此提取和别离各种蛋白质。