文档介绍：:彩艄毛南峰字日期:≯卅,,年多月签字日期:抄辍卧赂匕签字日期多辍卧聈一日机构的学位或证书而使用过的材料。与我二垌工作的同志对本研究所做的任何学位论文版权使用授权书学位论文独创性声明其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得直昌太堂或其他教育本学位论文作者完全了解直昌太堂有关保留、使用学位论文的规定,有权阅。本人授权直昌太堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所和中国学术期刊馀贪电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表,并通过网络向社会公众提供信息服务。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ学位论文作者签名中:导师签名中:.一.
.㈣,随着集约化养殖的发展和环境恶化,由病原体,化学物质引起的各种疾病频繁发生于褶纹冠蚌的养殖群体中。过氧化物还原酶且桓鲂路⑾值目寡趸讣易澹能够维持细胞内的氧化还原平衡通过消除细胞内的过氧化氢和烷基过氧化氢。本对褶纹冠蚌的型蚪醒芯浚云诓髡饬嚼嗫寡化蛋白在褶纹冠蚌免疫统中的作用机制,为蚌类抗病机理研究提供理论依据。尬乒诎过氧化物还原酶的克隆及表达研究褶纹冠蚌基因的序列全长;其中瞬环,开放阅读框为,可以编码霭基酸。.。同源性分析显示含有灿械谋J谿催化中心“椭久富“”。二级结构包含鰍螺旋、个鄣>蛄斜榷院拖低发育树分析表明褶纹冠蚌与南极帽贝⑻窖竽凋、皱纹盘鲍过氧化物还原酶基因具有非常高的同源性。.觳庀允荆珻蛟谘O赴⑼馓啄ぁ⒈湛羌⒏卧唷⑷茸织中均有表达,其中以鳃组织表达最强,显著高于其他组织。嗜水气单胞茵刺激后在肝脏中贑虻谋泶锪坎欢仙仙被指吹秸K健T刺激后保笛樽楹投哉兆橹渚哂邢灾圆钜臁贝锏郊灾将进行体外重组并在大肠杆菌甤惺迪直泶铩@用甈治霰泶锊铮⑾志璉盏嫉氖笛樽榻峡瞻锥哉站处增加了一条明显的蛋白条带。说明基因在吮泶锵低衬芄坏玫表达。褶纹冠蚌净虻膃蛄腥ǔ浩渲’端端,开放阅读框,“⑶乙埠姓婧松锏湫奶征序列“’’,由此可以得出结论:粲诘湫级结构包含鯽螺旋、鰌折叠,间隔有挝薰嬖蚓砬O低辰飨允荆褶纹冠蚌肫渌镏值腜畚R恢АR虼宋颐墙獵归为亚家区为,瞬环肭二族中。,琌ぁ··‘。。●。’!!!!痮‘。。。。。’’。。。‘。‘。。。‘‘。‘!!!!!!。‘。■一一一一,‘■
表达。体外抗氧化实验证明,当浓度在㈣..觳庀允荆珻基因在血细胞、外套膜、闭壳肌、肝脏、鳃等组织中均有表达,其中以肝脏和鳃组织表达最强,显著高于其他组织。嗜水气单胞菌刺激后在肝脏中冢珻基因的表达量高于对照组,在刺激后焙笛樽楹投哉兆橹渚哂邢灾圆钜臁贝锏郊灾将刑逋庵刈椴⒃@用甈治霰泶锊铮⑾志璉盏嫉氖笛樽榻峡瞻锥哉站处增加了一条明显的蛋白条带。说明蛟赑原核表达系统能够得到时,。关键词:褶纹冠蚌;过氧化物还原酶;克隆;原核表达摘要
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本研究所用仪器设备及试剂琼脂糖⒏拾彼帷⒍鴖、丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺、◆:尽溶液和缓冲液除特痢注明外,均参照《分子克隆实验指南》配制。◆主要仪器和设备、质粒抽提试剂盒、胶回收试剂盒:尽锎炕约梁校禾旄萍加邢薰尽、限制性内切酶、用浮水:宝生物大连有限表达载体:《,尽表达宿主菌:大肠杆菌辍克隆宿主菌株:大肠杆菌。⑦溥颉⒖悸硭沽晾禦、胰蛋白胨、酵母粉、、试验中其它化学试剂除特别注明外,均为国产分析纯。实验室所用引物由上海生工生物工程技术服务公司合成。基因测序由华大基因完成。凝胶成像系统./:‘┰鲆型汉贾菥Ц窨蒲б瞧饔邢薰尽定量移液器.、/、、台式冷冻离心机型⑻。水平摇床型航仗ú质笛樯璞赋А脱色摇床瓸:江苏兴化分析仪器厂。电泳仪型、:北京君意东方电泳设备有限公司。水平电泳槽型⒋怪钡缬静.:北京六一仪器篒尽酶、、公司。公司。⋯尽公司。厂。、籘⋯.。‘一’’
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