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选修3同步知识点.docx

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选修3同步知识点.docx

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高中生物课件群:209173084,高考填志愿信息群:790594415,
目录
微生物培养 1
培养基 2
土壤分解纤维素细菌的分离——稀释涂布 3
平板划线法 5
植物细胞工程进阶 7
植物细胞工程 7
植物细胞工程的应用 8
动物细胞工程进阶 10
干细胞概念介绍 10
动物细胞培养 11
胚胎工程进阶 13
胚胎工程的理论基础 13
【第二节】胚胎工程技术及其应用 14
【第三节】动物细胞核移植 16
基因工程1 18
基因工程的工具概述 18
限制酶的选取原则 19
酶切片段种类分析 20
基因工程2 21
基因工程的基本过程(一)——目的基因的筛选与选取 21
基因工程的基本过程(二)——重组载体构建导入及筛选 22
基因工程的基本过程(三)——目的基因的检测与鉴定 24
PCR及基因工程应用 26
PCR和电泳技术 26
基因工程的应用 28
蛋白质工程的一般过程 29
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微生物培养
纤维素构成植物细胞壁的主要成分,在自然界中大量存在,人类缺乏分解纤维素的肠道微生物无法直接利用纤维素,如果能够利用高效的微生物分解纤维素产生葡萄糖供人类利用,可以极大的缓解粮食问题和环境问题。那么思考下列问题:
,哪种土壤适合用于分离纤维素分解菌?
?
?如何判断分解效率?
?
培养基
培养基:为人工培养微生物而制备,适合微生物生长、繁殖或积累代谢产物营养基质。
培养基的成分各种培养基的配方不同,但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等最基本的物质。配制固定培养基的时候一般会加凝固剂,琼脂是常用的凝固剂。
培养基的分类
物理状态
成分了解程度
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功能
无菌技术       
土壤分解纤维素细菌的分离——稀释涂布
以纤维素为唯一碳源的培养基制备
培养基配方 
配置过程:计算——称量——溶解——(调节PH-分装-包扎)——灭菌
倒平板
用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上,待培养基冷却到50 ℃左右时开始倒平板。
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在酒精灯火焰旁一只手拿着装有培养基的锥形瓶,另一只手拔出瓶塞,使瓶口迅速通过火焰2~3次,并转动瓶口,通过灼烧灭菌,防止瓶口微生物污染培养基。
再取无菌培养皿,在火焰旁用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于锥形瓶瓶口的缝隙,将锥形瓶中的培养基倒入培养皿中,不要完全打开,以免杂菌污染培养基。注意不要将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,容易在皿盖与皿底之间培养基上滋生。
等平板冷却凝固后,将平板倒置备用,防止冷凝水回流。
稀释涂布平板法接种及计数
操作:将1土壤溶解于100mL的无菌水中制成土壤悬液,逐步10倍稀释,选取,,三个浓度,每个浓度至少3个平板。
每克土壤样品的细菌数=某一稀释度几次重复培养后的菌落平均数×稀释倍数(涂布所用稀释液为1)。
例子:稀释下,取菌液1涂平板后,三个平板的菌落平均数是250个,则每克土壤样品的细菌数=×

(1)血球计数板:血球计数板其上有特定面积为1、 的计数室,一个计数室又被分成25个(或16个)中方格,每个中方格再被划分成16个(或25个)小方格,每个计数室都由400个小方格组成。
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图为25×16的计数室
(3)操作过程
①血球计数板盖上盖玻片→无菌滴管吸取摇匀的微生物培养液,滴在盖玻片边缘,缓慢渗透进入计数室。
②加样后静止5 ,然后在显微镜下计数4~5个中格中的细菌数,并求出每个小格所含细菌的平均数,再按计算公式求出每毫升样品中所含的菌体总数。
③计算公式:1 悬液所含菌体总数=每小格平均菌体数×400××稀释倍数。
④例子:5×5的中方格中有15个细菌,则悬液所含菌体总数=×400××稀释倍数。

(1)稀释涂布平板法计数,能直接区分活细胞和死细胞,但是计数结果偏少。
(2)显微镜直接计数法,不能直接区分活细胞和死细胞,除非用染色剂,如台盼蓝。
平板划线法
——平板划线接种
(1)临时保藏:使用频繁,先接种到试管的固体斜面培养基上培养,然后4度保藏。
(2)甘油管藏:长期保存的菌种,先把菌液转入到灭菌后的甘油中,混匀放在零下20度的冷冻箱保存。
——平板划线接种
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植物细胞工程进阶
植物细胞工程
、组织或细胞等,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其形成完整植株的技术。

(1)原理:植物细胞的全能性
(2)组织培养的过程

(1)原理:植物细胞膜的流动性和植物细胞全能性,变异类型属于染色体变异。
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(2)过程
(3)意义:克服了不同生物远缘杂交不亲和的障碍。
植物细胞工程的应用
植物繁殖的新途径
(1)快速繁殖:用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术叫作植物的快速繁殖技术,也叫微型繁殖技术,是一种无性繁殖。
(2)作物脱毒:如马铃薯、草莓等植物正常情况下易感染病毒,通过无性繁殖传给后代后致使产量下降,利用植物顶端分生区附近(如茎尖)这种无病毒的外植体进行组织培养,达到脱毒的目的。
(3)人工种子:组织培养到胚状体、不定芽、顶芽、腋芽等为材料经过人工薄膜包装得到的种子。

(1)单倍体育种
①取材:花药(或花粉)。
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②过程:其中花药离体培养的过程属于组织培养。
③意义:极大地缩短了育种年限,节约了大量的人力和物力。
(2)突变体的利用:在植物的组织培养过程中,由于培养细胞一直处于不断增殖的状态,因此它们容易受到培养条件和诱变因素(如射线、化学物质等)的影响而产生突变。其中产生的有用的突变性状通过有性生殖无法传递或者产生性状分离,利用组织培养可以维持突变体的优良性状。
(3)异源多倍体
①技术:植物体细胞杂交。
②如白菜—甘蓝、普通小麦—长穗偃麦草等。

(1)次生代谢产物:植物会产生一些对人体十分有用的次生代谢产物,次生代谢产物不是生物生长所必需的,一般在特定的组织或器官中,并在一定的环境和时间条件下才进行。所以次生代谢物含量低、难提取。通过植物细胞培养可以大量的提取次生代谢产物。
(2)植物细胞培养
①在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖。
②一般培养到愈伤组织阶段,植物细胞培养用的是液体培养基。
(3)实例
①紫草宁:从紫草细胞中提取的一种药物和色素,具有抗菌、消炎和抗肿瘤等活性。
②紫杉醇:红豆杉属植物体内的一种次生代谢物,具有高抗癌活性。
③人参皂苷:利用人参细胞培养的人参中重要的活性成分。
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动物细胞工程进阶
干细胞概念介绍
:早期胚胎、骨髓和脐带血等。干细胞分类:胚胎干细胞、成体干细胞等。

(1)分布:早期胚胎。
(2)特点:具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞,并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。
(1)成体干细胞
(1)特点:具有组织特异性,只能分化成特定的细胞或组织,不具有发育成完整个体的能力。
(2)分类:造血干细胞、神经干细胞、精原干细胞等。
(2)诱导多能干细胞(简称iPS细胞)
(3)来源:通过体外诱导小鼠成纤维细胞,获得了类似胚胎干细胞的一种细胞。已分化的T细胞、B细胞也能被诱导为iPS细胞。
(4)诱导方式:借助载体将特定基因导入细胞;直接将特定蛋白导入细胞;用小分子化合物诱导。
(5)特点
(a)诱导过程无须破坏胚胎。
(b)可来源于病人自身体细胞,理论上可以避免免疫排斥反应。
动物细胞培养——干细胞