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临床检验学基础
临床检验学基础绪论•目前,我国临床医学检验(clinicalmedicallaboratory)的设置,主要包括临床生物化学、临床血液学、临床微生物学、临床免疫学、临床分子生物学和临床检验基础。由于临床医学检验与临床医学日益结合,因此已形成了包括实验诊断学在内的临床检验医学(clinicallaboratorymedicine)。
•临床检验基础是一门高度综合性的应用科学,是临床医学和实验室医学的桥梁学科,是前期课程的延伸,,生物化学,分子生物学,生物医学工程学和电子技术等学科的发展,医学临床检验又吸收引进了大量的其他学科的先进技术,使临床检验工作在分析检测的速度和灵敏度上有了很大的提高,检测的方法学有了很大的发展.
•主要内容:本门课程由一般血液检查,血栓与止血,体液检验,:本门课程的教学目的和基本技能训练要求是:通过对临床诊断应用较广泛的各种标本的检测,使学生对临床检验工作形成较深刻的理解,掌握各种实验室理论和操作技能,养成良好的实验室工作作风,为毕业后能从事临床检验技术工作和管理工作奠定良好的理论和实验室基础.
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•临床检验,源于古代对尿液的感官检查,如尿液的颜色、气味等。
17世纪荷兰Leeuwenhoek发明显微镜,跨时代地推动了医学走进微观世界。人们从认识静态的血液细胞形态开始,逐步深入到研究细胞的功能、大分子物质、基因的结构和功能,试图探究生命现象的本质。
20世纪末以来,临床医学检验的加速发展,是现代物理学、化学、生物学、数学等学科之间相互交融的结果,特别是医学检验技术的进展,更直接映射出现代电学、电子学、计算机科学、光学等自然科学基础学科与生物化学、免疫学、细胞生物学、遗传学、分子生物学等生物医学基础学科杰出结合的光辉;而当前正在兴起的现代信息网络技术,又进一步实现了病理学、影象学等形态检查的远程医学传播,为临床医学及时提供了检测报告和实时交流。
•临床检验基础,借助先进的检测技术,对来自离体的血液,、化学、病原学和显微镜形态学的检查,以简便、快速的检测结果,基本满足临床医学检验筛检疾病的需求。
近20年来,临床检验基础的发展具有以下鲜明的特征•:•1、从手工检测步入仪器自动化、电脑化检测。
20世纪50年代初问世的血液分析仪,从仪器自动计数血液红细胞、白细胞几项参数开始,到如今发展到综合运用电学、光学、,能同时提供全血细胞计数及其相关参数和(或)网织红细胞计数.”幼稚细胞”分类等多项参数。血液分析仪的特点包括:用血量少(以微升计)、检测快速(以分、秒计)、检测项目多(参数达20~40余项)、精度高(变异系数可低于1%)、自动质量控制(提供多种质量方式和质控图形)以及信息取存和联网系统。•用于临床检验基础的检验仪器,还有尿液干化学分析仪、尿沉渣分析仪、血沉仪等。同样具有检测简便、快速、精密度高的特点。
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(pointofcaretest,
POCT)
•这种检测方法省去了标本转运的程序,使检测的标本更新鲜、交叉污染率更低,更接近被检者当时生理或病理实际状态。床边检测标本用量更少、检测速度更快、检测场所更灵活、结果报告更及时(常立等可取),对检验者无需专门培训。干化学单项试带或多联试带尿液定性或半定量检测,是典型的床边检验实例。
、配套化、专业化和多样化已有许多优质的商品化试剂应用于临床基础检验,包括瑞氏染色液,血液分析仪、止凝血检测用的配套试剂盒、尿液分析仪用配套的试带等。
。
当前,我国检验界十分重视对血液分析仪、尿液沉渣显微镜检查操作的标准化。目前,已经有血液分析仪的评价系统,保证了检测质量和各种仪器之间的可比性。对床边检测项目更要求标准化、规范化,对止凝血等各种商品化检测试剂,强调必须达到应有的检测灵敏度和特异性。
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。在人员方面,主要是检验人员的医德素质和技能素质。检验者必须有高尚的医德、熟练的技能;熟悉如何避免检验前、中、后影响检测结果准确性的各种因素和防止主要干扰内素的具体方法。检验过程中,检验人员必须作好严格的室内质量控制,并积极参与室间质量控制的活动,不断提高检验质量的准确性和可靠性。
,标本的采集和转运过程尤为重要;管理好这两个环节,可降低70%的检验差错率。检验用的标本通常有血液、尿液、粪便及其他体液。有些标本的采集,需用严格的消毒方法,并带有一定的创伤性。因此,检验人员应事先向患者解释,让患者充分理解、积极配合,从而获取合格的标本。
(1)标本采集原则:
留取标本的基本原则是保持离体标本采集质和量的完整性。任何离开人体的标本,要尽可能保持体内当时生理或病理的固有状态:使标本的有形部分(指一般能用普通光学显微镜观察到的成分,如各种细胞、虫卵等)和无形成分(指一般能溶解于液体,不能用显微镜观察到的化学物质,如蛋白质、葡萄糖等)的质和量基本不变。事实上,任何机体中的成分,一旦离开人体,则受到环境的影响,会发生改变。衡量标本是否新鲜的简单尺度,是从标本采集到检验所允许的时限。因此,标本越及时送检、越早完成检验,检验结果就越可靠。
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2)避免非疾病因素:
•非疾病因素造成检验结果异常的主要环节可分为3个阶段:第1阶段是在检测前,包括是否有合格的操作人员、合乎要求的标本以及被检测者当时的生理特征和状态;第2阶段是在实验检测中,包括具体的检测方法、仪器和试剂的质量等;第3阶段是检测后对结果的正确评价和解释。
(1)生理变异:
由生理因素引起检验结果变异比检测过程中产生的技术性变异往往更大。生理变异可分为两大类:一类是不能控制的,如年龄和性别,对检验的影响是长期效应;另一类是能够加以控制的,如食物、药物、情绪、活动状态、体位等,对检验的影响多为短期效应。
年龄:一般而言,检测时应考虑四组年龄:新生儿、儿童期到青春期、***和老年人。
性别:不少检测项目的参考值,男女有别,即使在同一年龄阶段,也有明显的差异。
这种情况主要反映在青春期后。例如:在15—40岁,男女的红细胞计数值不同,女性一般低于男性;妊娠期中后期,红细胞计数值随血容量增高和血液稀释可明显减低;红细胞沉降率,女性高于男性,如妊娠期3个月以上,可进一步增高。
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体位:直立时,血容量比卧位平躺时减少600—700ml。从卧位到直立时,血容量可减少10%左右。
运动:对检验结果的影响程度,与运动的强度和时间长短有关。
时间和状态变化:昼夜更替、睡眠与觉醒状态、暴热、寒冷、紧张,可使肾上激素分泌变化,从而引起血细胞数量、质量和许多物质浓度的改变。
(2)饮食因素:
•如刚进食不久即作血液检测,可见血葡萄糖、脂肪浓度增高。长期素食者,尿液偏碱,血维生素B12接近缺乏,胆红素则较高。禁食、减肥者,血糖和胰岛素减低,血***体可明显增高,血清许多酶活性增高,严重者还可发生酸中毒。饮酒者,产生轻度醉酒时,血葡萄糖浓度就可增加20%-50%。吸烟者,吸入一支烟,,可持续1h之久,红细胞计数、白细胞计数增高,精子计数减少,异形精子率增高,精子活动力减弱。
(3)药物因素:
口服方式,药效作用慢而持久;注射或吸入方式,药效作用快而短促。当出现了不可思议异常检验结果时,或与临床不符合时,应考虑是否有药物引起干扰。例如,高浓度维生素C,可使乳酸脱氢酶活性减低、尿干化学胆红素试验和尿糖试验假阴性,而使班氏尿糖测定假阳性。口服避孕药可影响许多试验的测定,也应特别注意。
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•因此,对短期效应的生理因素进行有效的预控,是保证检验质量至关重要的环节。
二、•如将血液分析仪和显微镜检查有机结合,可提供全血细胞数量和质量(形态)众多的参数和红细胞、血小板、白细胞异常的最基本的实验诊断信息。例如,白细胞(中性粒细胞)数量增高和血沉增高,支持急性心肌梗死的诊断,可与心绞痛鉴别;显微镜发现病原体,是确诊感染性疾病的依据。
•例如,尿液蛋白质检测对于肾脏疾病患者的病情估计、网织红细胞计数对于进行化学疗法和放射疗法的患者或贫血患者的骨髓功能判断均具有可靠而实际的指导作用。
•例如,从标本中检出寄生虫,可对感染人群进行必要的治疗和(或)隔离,防止疾病的传播和传染。
•、基本检验方法和操作技能。
•(5)
•包括检验项目涉及的生理、病理基础,特别是检验基本理论.
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•临床检验基础的许多操作是进行其他临床医学检验的必要基础,包括标本采集、操作规范、质量控制等。因此,特别强调学生在实验课或在临床实****中动手能力的训练。
•学会如何评估和选择灵敏度高、特异性好的检验方法,有时是恰如其分、正确地比较和认识手工检验方法和仪器检验方法的长处和短处。
•检验者应经常记忆最常用的检验项目参考值,以便结合临床,对检验结果进行有效的分析。现已用“参考值”代替过去常用的“正常值”。这是因为检验项目的测定结果,只能来自部分地区、部分健康人群的相对统计。再者,即使在选定的人群中,检验结果被纳入参考范围的也只占被检人群数的95%,还有5%人群末被统计在内。由于对每个患者发病前的基础检验值的情况了解甚少,所以仅凭一次出现“低于”或“高于”(特别是略低于或略高于)参考值范围的结果,并不能肯定为异常,通常至少应重复2次以上检验、并出现相同或相近结果时,才可认为检验结果可靠有效。
•检验人员应用循证检验医学新思维指导临床检验,不断追求和采纳已经科学评价和证明了的、具有当时最佳临床价值的“金标准”检验项目和最佳检验方法,为临床提供有效的检验结果,要主动与临床保持联系,共同分析异常检验结果的原因。必须认识到,由于医学检验在时间上和空间上存在一定的局限性,因此,对任何检验结果均需慎重分析,才能作出符合实际的合理解释。
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•第一章血液标本采集和血涂片制备第一节血液标本采集和抗凝剂选择血标本分为全血、血浆和血清等。全血:由血细胞和血浆组成,主要用于临床血液学检查,如血细胞计数、分类和形态学检查等。全血标本的化学物质检查易受血细胞量增减的影响,现在的临床化学检查已较少使用全血标本。血浆:为全血除去血细胞的部分,用于血浆生理性和病理性化学成分的测定,适合临床生化检查,特别是内分泌激素测定;血浆除钙离子外,含有其他全部凝血因子,适合血栓和止血的检查。细胞内、外各种溶质成分和含量有差别。疾病时,血细胞内成分变化较小,但血浆中成分变化可很大。血清:是离体后的血液自然凝固后析出的液体部分,除纤维蛋白原等凝学因子在凝血时消耗外,其他成分与血浆基本相同,更适用于多数临床化学和临床免疫学检查。在少数项目检查,血浆和血清的测定也有些差别。
•血标本的正确采集是获得准确、可靠实验结果的关键。在标本采集前,应仔细考虑实验的需要,决定采血方法、所需血量及选用合适的抗凝剂。血液标本的采集分为皮肤采血法、静脉采血法和动脉采血法。不同的采血法无论细胞成分或化学组成,都存在不同程度的差异,因此在判断和比较结果时必须予以考虑。所有的采血技术均要求保持血液标本的完整性。