医学微生物学检验实验.ppt

文档介绍：临床微生物学检验实验二
药敏试验(K-B法、肉汤稀释法)
一、药敏试验
1、K-B法实验材料:
MH培养基、无菌棉棒、无菌生理盐水
菌种(金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌)
抗菌药物纸片(-4℃保存备用)
麦氏比浊管一套
实验方法:
(1)待检菌液 6×108 CFU/ml(自配)
(2)操作
待检菌液 MH琼脂表面贴含药纸片
无菌棉签
涂布
室温5min
35℃
16~18h
观察结果
操作注意事项:
菌液应在15分钟内接种完毕
注意纸片距离
>24mm
>15mm
(3)结果
测量抑菌圈直径
20mm
表1 常用药敏试验纸片判断标准与其相应的MIC近似值
抗菌药物纸片抑菌圈直径(毫米) 最低抑菌浓度(μg/ml)
含药量耐药中度敏感敏感耐药敏感
青霉素 10单位≤11 12~21 ≥22 ≥32 ≤
链霉素 10μg ≤11 12~14 ≥15 ≥15 ≤6
***霉素 30μg ≤12 13~17 ≥18 ≥25 ≤
红霉素 15μg ≤13 14~17 ≥18 ≥8 ≤2
庆大霉素 10μg ≤12 13~14 ≥15 ≥8 ≤4
卡那霉素 30μg ≤13 14~17 ≥18 ≥25 ≤6
四环素 30μg ≤14 15~18 ≥19 ≥12 ≤4
多粘菌素B 300单位≤8 9~11 ≥12 ≥ 50单位
磺*** 300μg ≤12 13~16 ≥17 ≥350 ≤100
甲氧苯青霉素 5μg ≤9 10~13 ≥14 —≤3
奈啶酸 30μg ≤13 14~18 ≥19 ≥32 ≤12
2、肉汤稀释法
实验材料:
MH肉汤25支/组、无菌生理盐水等
(上次课已备)

菌种(金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌)
麦氏比浊管一套
实验方法:
(1)配制菌液 6×108 CFU/ml
(2)配制药液
+5ml生理盐水 105ug/ml
1:5稀释
2×104ug/ml药液