文档介绍：实验二土壤中微生物的 分离与纯化
实验从土壤中稀释分离微生物
一、实验目的:
学****微生物稀释平板计数及划线分离技术
二、实验原理
采用适宜(选择)培养基和培养条件,或加入某种抑制剂有利于目标微生物的生长,从而分离获得目标微生物的纯培养:常用稀释平板分离法和划线分离法
在固体培养基上形成单个菌落。
分离细菌用牛肉膏培养基,分离放线菌用高氏培养基,分离真菌用马丁-孟加拉红培养基。
依据一个单细胞在固体培养基上培养后可以长成一菌落从而推算样品中含有多少细菌或真菌的活菌数目
土壤是微生物的大本营
从土壤中稀释分离微生物的方法如下:
(一)土壤悬液制备
准备1瓶土壤悬液:称10克土壤放入带玻璃珠的90ml瓶装无菌水中,手摇振荡(10-20min),使土样分散。
三、实验步骤:
(二)倒固体琼脂培养基平板:
分离细菌的同学取一瓶牛肉膏培养基(350ml/瓶) 熔化后,凉至45-50度倒平板。
(三)悬液稀释:方法见下图:
(四)悬液涂布(演示):
无菌操作(从稀至浓将菌液涂布均匀)采用10-3,10-4,10-(演示)
平板涂布
简单易行,但易
造成机械损伤
Liquid specimen is spread on the surface of solid agar with a sterile bent glass rod.
五、划线分离
每人用剩下的1个平板做划线分离,从三角瓶中取土壤悬液作划线分离
平皿划线分离法