1 / 39
文档名称:

法医病理学-组织切片制作.ppt

格式:ppt   大小:828KB   页数:39页
下载后只包含 1 个 PPT 格式的文档,没有任何的图纸或源代码,查看文件列表

如果您已付费下载过本站文档,您可以点这里二次下载

分享

预览

法医病理学-组织切片制作.ppt

上传人:核辐射 2022/11/24 文件大小:828 KB

下载得到文件列表

法医病理学-组织切片制作.ppt

文档介绍

文档介绍:该【法医病理学-组织切片制作 】是由【核辐射】上传分享,文档一共【39】页,该文档可以免费在线阅读,需要了解更多关于【法医病理学-组织切片制作 】的内容,可以使用淘豆网的站内搜索功能,选择自己适合的文档,以下文字是截取该文章内的部分文字,如需要获得完整电子版,请下载此文档到您的设备,方便您编辑和打印。法医病理学-组织切片制作
固定的目的:
,防止组织的自溶与***。

,使不同的组织成份对染料有不同
亲和力,使细胞各部易于受色。
,为制作薄切片奠定基础。
注意:材料块不能过大,固定器皿不易过小,固定液量不易过少,应是固定材料体积的20一30倍。
(二)固定液:
根据检验目的不同选择不同种类固定液,如糖原检查:不含水的固定液;电镜检查:锇酸固定液等;HE染色:甲醛。
固定液:用以固定组织的药剂。
固定液分类:单纯固定液,由一种药剂组成;混合固定液(或复合),由二种以上的药剂组成。
:
①具有强的穿透力,固定均匀,能迅速渗透到组织内部使组织细胞结构保持生活状态。
②不使组织过度收缩与膨胀而变形。
③能迅速使组织中的蛋白质、糖、脂肪等物质凝固成为不溶性物质。
④使组织达到一定的硬度便于切片制作。
⑤价格便宜,易购买,配制方便。

乙醇(酒精)、甲醛(福尔马林)、***钾、苦味酸、锇酸、***、冰醋酸
(1)乙醇(酒精)(alcohol)
优点:
①价格低,易购买,易溶于水,使用方便,95%浓度,无水乙醇100%;
②市售有两种:100%;95%;
③能硬化组织起固定作用;
④也是一种最常用的脱水剂。
固定用浓度在70%~80%,酒精浓度愈大组织收缩愈严重,浓度过低起不到固定作用。
缺点:
①穿透力小,由于被固定的组织表面硬化,固定液不容易渗透到组织中去,所以用乙醇固定的组织材料要小。
②使组织严重收缩。
③由于酒精能沉淀白蛋白、球蛋白和核蛋白,核蛋白的沉淀物易溶于水,使细胞核核色不佳。。
④溶解脂肪、血红蛋白和多种色素,脂肪染色必须制作冰冻切片。
:(福尔马林)(formalin)
最常用的固定液,一种还原剂,无色透明极易挥发有强烈刺激性气味的液体,不能与氧化剂混使用。可应用于组织学、组织化学、免疫组织化学等染色,最好用时现配。
商品甲醛:37%~40%甲醛水溶液。
固定液的浓度:4%~8****惯上称为10%或20%的福尔马林)。
固定时间:常温下固定24h~48h。快速固定,可加温到70℃~80℃或者加温煮沸10min即可。快速固定,组织块不宜过厚或过大,缺点是组织收缩较严重。
固定液配制:甲醛1份与9份自来水混合即为10%(4%)浓度的甲醛固定液。
优点:①渗透力较强;②组织收缩小;③细胞核染色较好。
缺点:
①质量较差的formalin在低温下久存容易产生一种白色的沉淀物称“三聚甲醛”(付醛),经氧化成为甲酸而使溶液呈酸性,影响细胞核染色。可在备用甲醛溶液中放入适量的碳酸钙或碳酸镁,简便的办法可在溶液中投入适量的大理石或者白色粉笔作为中和剂。
②酸***尔马林固定的组织多易产生一种褐色或黑色细颗粒状物,称为福尔马林色素,在切片上形成黑色小颗粒,不溶于水和酒精,影响染色效果和切片的观察。
去掉福尔马林色素颗粒方法:
①Schridde法
25%氨水lml
75%酒精200ml
切片脱蜡经70%酒精时,用上液浸泡半小时或稍长一些时间,然后水洗再行染色。
②Verocay法
l%氢氧化钾水溶液lml
70%酒精100ml
切片脱蜡经酒精80%时入上液处理10分钟,经70%酒精入水后即可染色。
(三)水洗
,彻底清除组织块中的固定液。

、大小可灵活掌握水洗工具,可用水洗
筐或用纱布包裹,防止水流过大将组织块冲掉或丢失。
(四)脱水
组织块固定后虽然已经硬化,但达不到切薄片的硬度,必须制成石蜡组织块,脱水是继固定后的重要步骤。
 经固定和水洗后的组织含大量水分,在这种情况下首先必须除去组织内部的水分,这种除水的过程叫做脱水,脱水使用的药剂称为脱水剂。
脱水必须逐渐依次从低浓度酒开始到高浓度酒,否则引起组织强烈收缩,变脆不利制片。脱水不彻底也很难浸进石蜡。
常用脱水剂:溶于水和透明剂的试剂,如酒精、***、正丁醇等。
(1)酒精
步骤:70%80%90%95%100%Ⅰ
100%Ⅱ,一般数小时到12小时,更换一次酒精。
配低浓度酒精时,可用市售95%酒精配制。70%酒精:95%酒精70ml加蒸馏水25ml至95ml;80%酒精:95%酒精80ml加蒸馏水至95ml,依次类推。
(2)***
脱水作用与酒精相似,虽其脱水作用比酒精强,但可引起组织块的收缩较,价钱较贵,故不宜用于一般组织脱水,它即有脱水作用又有透明作用,用***固定的材料要小,脱水1~8小时即可。
(五)透明
目的:因为酒精与蜡不能相交换需要借助石蜡诱导剂的媒介作用。石蜡诱导剂渗入之后组织块往往呈现透明状态****惯上将石蜡诱导剂渗入组织内的过程叫透明,用于透明的试剂称为透明剂。
透明时间:根据组织块的大小而定,一般20分钟至1小时。组织块过大可延长透明时间,透明好的材料如同油炸的感觉呈透明状。
透明剂:二甲苯、***仿、甲苯、香柏油等。最常用二甲苯。
二甲苯:无色透明有机溶媒,有很强的刺激气味,易挥发,长期接触对粘膜有刺激作用,透明作用很强,可使组织收缩变形,透明时间不宜过长。如遇到组织块内部或某一个部位呈白色混浊状态时说明脱水不彻底,如果造成透明不彻底应退回到100%酒精中重新透明。