3500遗传测序仪介绍课件.ppt

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肖怀东FieldApplicationScientist
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AB遗传分析仪发展历史
370373377
3100(A),3130(xl)
310
3730(xl)
平板胶电泳
毛细管电泳
3500,3500(xl)
1986年370型全世界第一台基因分析仪
1991年373型基因分析仪
1995年377型基因分析仪,光栅+CCD
1996年310型毛细管基因分析仪,全世界第一台毛细管分析仪
1997年377-96基因分析仪
1998年3700型96道毛细管基因分析仪
2000年310016道毛细管基因分析仪
2002年3100Avant4道毛细管基因分析仪
2002年373048道毛细管基因分析仪
3730xl96道毛细管基因分析仪
2004年31304道毛细管基因分析仪
3130xl16道毛细管基因分析仪
2007年10月新一代超高通量序列分析仪SOLID
2009年3500系列毛细管基因分析仪
2010年第三代测序仪IonTorrent
测序仪工作原理
电进样
DNA在碱性环境下带负电荷
带负电荷的DNA在强电场作用下进入毛细管
15kv
仪器工作原理——电进样
TRIVIA:电进样意味着什么?
只有带电分子能够进入毛细管.
+
仪器工作原理-通过毛细管电泳分离DN***段
H+
H+
H+
H+
H+
H+
H+
H+
H+
H+
负极
正极
TRIVIA:什么样的片段泳动的更快?
-
仪器能够区分带电的DNA和其他带电分子吗?
小片段
不
仪器工作原理
-荧光标记的DN***段在检测窗口被检测
双向激发
仪器工作原理
荧光标记的DNA在电场中由负极向正极移动,依次通过激光检测区,小片段在前,大片段在后
激光束在检测窗口同时激发16/4根毛细管,荧光分子被激发,产生荧光信号
发射的荧光信号被CCD相机收集
软件将光学信号转化为电信号
Laser
Energy
:
CCD
Electrophoresis
+
-
dye
什么时候要做空间定位?
毛细管安装完成后,包括重新安装用过的旧毛细管
移动或调节了毛细管检测窗口的位置
仪器移动后
作为仪器日常维护的一部分
怎么做?
当仪器正常启动,毛细管已经安装在仪器上,仪器上的相应位置已经放置了胶、缓冲液和水;
进入DataCollection软件,
点击窗口左边的SpatialRunScheduler进入空间定位页面;
在左下角Protocol中选择一种运行模式,有不灌胶和灌胶两种模式
毛细管空间定位(SpatialCalibration)
Clicktosavethecalibrationdatatothedatabase
空间定位——结果评估