文档介绍：该【血液分子生物学造血干细胞课件 】是由【wangzhidaol】上传分享，文档一共【69】页，该文档可以免费在线阅读，需要了解更多关于【血液分子生物学造血干细胞课件 】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。造血干细胞
造血干细胞
一、造血干细胞的起源
*造血干细胞(hemopoieticstem
cell,HSC)是存在于造血组织和血液
中的一群原始造血细胞,它不是组织
固定细胞.
*造血干细胞在人胚胎2周时可出现于卵
黄囊.
*第4周开始转移至胚肝.
*妊娠5个月后,骨髓开始造血.
*出生后骨髓成为造血干细胞的主要来源。
*在造血组织中,所占比例甚少,如在
小鼠骨髓中105核细胞中的有10个,
.
造血干细胞的生物学
一、造血干细胞的增殖和分化
造血干细胞(hematopoieticstemcell,HSC)是各种白细胞和免疫细胞的始祖,担负极其重要的生理功能。 具有三个重要特征:
①高度自我更新或自我复制的能力;
②多向分化潜能;
③绝大多数可长期维持在非增殖状态,这些特征随着干细胞的分化逐渐减弱和消逝。
造血干细胞的特征和识别
造血干细胞没有明确的形态学特征,形态上都表现为淋巴样的单个核母细胞,这就给干细胞从形态的识别和检测带来了困难。
但从干细胞的功能及细胞表面抗原的表达上则为造血干细胞的识别和分离提供了条件。
造血干细胞的特征和识别
(一)功能的角度,可用细胞培养方法在体外观察细胞发育潜能
集落形成单位(CFU)
造血干细胞的特征和识别X
(一)功能的角度,可用细胞培养方法在体外观察细胞发育的潜能,
1、脾集落形成单位(CFU-S) 是较早期的造血干细胞,具有形成红细胞、中性粒细胞、嗜酸粒细胞、巨核细胞或混合多种造血细胞的多向分化能力。
2、髓系多向祖细胞集落(CFU-GEMM)
是检测可以生成红细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和巨核细胞的祖细胞,它具有一定的自我复制能力,有向不同细胞学分化的能力,具有造血干细胞的部分功能。
3、长期培养起始细胞(LTC-IC),是指那些经5-8周培养后仍能生成单向或多向性祖细胞群的造血细胞,比较接近多能干细胞,这种检测方法是近几年实验和临床研究中国的较多、较可靠的干细胞检测方法。
上述检测和实验的方法都不能直接识别单个干细胞。
造血干细胞的特征和识别
(二)细胞表面抗原表达及其单克隆抗体
1、CD34+细胞为具有造血重建能力的人造血干细胞,
2、CD34+、Thy-1low、Lin-为造血干细胞特征,其中Thy为胸腺细胞表面抗原标记,Lin为特定细胞系的系列标记,如果表达阳性,那么它就成为已分化的细胞。
3、CD34+、CD33-、Lin-、HLA―DR-代表造血干细胞,其中HLA―DR与细胞的增殖有关,而干细胞常处在非增殖状态,因此干细胞应不表达HLA―DR。
CD34+细胞选择法
亲和柱层析,分离和免疫磁珠法。通过特异性识别、俘获及洗脱分离得到CD34+细胞。
(1)亲和柱层析:将预分选的细胞与生物素化(biotinglated)的抗CD34抗原的单抗一起孵育,然后洗去未结合的抗体,通过抗生物素蛋白包被的聚丙酰***柱的亲和柱,使CD34+细胞留滞在柱内的聚丙酰***表面上,再经机械摇动,冲洗出CD34+细胞。
造血干细胞(HSC)主要来源于骨髓、***外周血、脐血
脐血来源干细胞的特点
CD34+细胞数低于骨髓,但CD34+CD38-细胞数高于骨髓,且脐血CD34+CD38-细胞增殖分化能力高于骨髓,尤其是加入各种细胞因子后CFU-GEMM(多向祖细胞)、BFU-E(红系祖细胞)集落数明显高于骨髓。
淋巴系统抗原表达弱,淋巴细胞功能不成熟,这显示出脐血干细胞移植(UCBT)后移植物抗宿主病(GVHD)的发生率可能较低。
研究表明冻存10年的脐血HSC仍具有良好的回收率。
干细胞的可塑性
对造血系统被破坏的小鼠进行肌细胞移植后,小鼠造血功能恢复,是由于肌肉组织内的造血干细胞的作用引起.
■肝损害的小鼠进行骨髓移植后,肝脏再生的原因是骨髓中的卵圆细胞在肝内转化为肝细胞.