文档介绍：浙江理工大学
硕士学位论文
家蚕BmAWD基因的表达、纯化和亚细胞定位
姓名:赵贤能
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:童富淡;张耀洲
20090601
摘要在对本实验室构建的家蚕蛹期文库测序中,我们筛选到一条编码鞍椎腸蛄校涿狟基因。通过,编码个氨基酸残基,含有一个保守结构域。通过┰龌竦酶没騉框并克隆到表达载体..希玫街刈楸泶镏柿一特异性蛋白条带,与预期值相符,但目的蛋白主要以沉淀即包涵体形式存在,层析法纯化融合蛋白⒚庖咝挛骼即蟀淄茫票窯多克隆该抗体对刑匾煨允侗鹉芰ΑQ窍赴ㄎ槐砻鞯鞍譈同时存在于赴南赴始跋赴酥小L崛∥辶洳系母鞲鲎橹透鞲鍪逼卵,表皮中表达量最高,脂肪体中表达量最低,在蛹期中表达量最高,在卵期表达白亚基,っ赋舜呋塑斩姿和核苷三磷酸涓能磷酸基团的转移外,还具有蛋白磷酸转移酶活性。本研究将为了解家蚕蛟诩也现械淖B肌⒈泶锏惹榭觯教旨也螧基因在家蚕生关键词:家蚕;颍缓塑斩姿峒っ福谎窍赴ㄎ唬挥ü舛縋浙江理工大学硕士学位论文生物信息学分析,发现该基因序列全长为,蛭该重组子转化大肠杆菌,经⒚盖屑ㄖっ髦刈檎贰T嫦乱诱导表达后收集菌体并裂解,甈治龇⑾衷左右处有一℃下诱导表达,甈治霰砻髂康牡鞍字饕4嬖谟谏锨逯小2捎们缀抗体,觳飧枚嗫寺】固宓男Ъ劭纱锏絣:琖检测显示幼虫,蛹,蛾淖躌,进一步用荧光相对定量觳獗砻鰾在量最低。蛭@コ娉崤桃斐7⒂颍嗦胍桓鼍哂蠳激酶活性的蛋长、发育过程中的功能打下基础。
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缩略语浙江理工大学硕士学位论文氨苄青霉素过硫酸氨表达序列标签异丙基硫代—半乳糖苷十二烷基硫酸钠·家蚕翅盘异常发育基因基因乙二***四乙酸还原性谷胱甘肽谷胱甘肽硫转移酶猵多克隆位点美国国立生物技术信息中心开放阅读框聚合酶链式反应丙烯酰***凝胶电泳
⋯一虢乙睨乔日期叩彩月明浙江理工大学学位论文原创性声明本人郑重声明:我恪守学术道德,崇尚严谨学风。所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已明确注明和引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的浙江理工大学硕士学位论文内容。论文为本人亲自撰写,我对所写的内容负责,并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。
扩贸水日褥:沙降凫嗍餐蛟日浙江理工大学学位论文版权使用授权书浙江理工大学硕士学位论文学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅或借阅。本人授权浙江理工大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。年解密后使用本版权书。指导教师签本学位论文属于学位论文作者签名:保密口,在不保密口。
文献综述与实验设计第一部分浙江理工大学硕士学位论文
第一章序言浙江理工大学硕士学位论文我们通过蛹也嫌糲目庵谢竦肂腸蛄校渫暾腛序列长氨基酸残基,预测分子量为.。我们将扩增到的蚩寺〉饺合表达载体..、酶切鉴定以及测序证明重组子是正确的。将该重组子转化大肠杆菌,用终浓度蛟诩也仙ぁ⒎⒂讨械墓δ埽Mü寺〖也螦基因,在大肠杆菌中表达并纯化该蛋白,制备兔源多克隆抗体,用于亚细胞定位、组织定位、表达时序、扇诺仁笛椤1狙芯拷I钊胙芯考也螧在家蚕是一种典型的鳞翅目类经济昆虫,是一个很好的模式生物,并可大规模饲养,研究其生长发育的调控机制对家蚕品种的选育和改造具有重要的意义。同样作为模式生物,与果蝇相比,家蚕基因组要更复杂,基因数量更多匀旧澹个连锁群>突旧镅窒蠖裕也匣蜃榈南低逞芯坎唤瞿芊岣换础科学理论,也对解决人类疾病、延长寿命等重大问题具有重要的参考价值。尤其是家蚕遗传资源中存在有大量疾病模型,如致瘤模型、不育不妊模型、发育畸形模型等,这些遗传模型的详细研究,将对人类疾病相关基因的功能、疾选题的目的,编码为/,在右的位置有一条特异性蛋白条带,与预期值诤媳昵,相符。融合蛋白以可溶性形式存在,故用超声裂解菌体后离心所得的上清进行蛋白纯化。为了了解家蚕蛟诩也现械淖B肌⒈泶锴榭觯教旨也生长、发育过程中的功能奠定基础。肜コ娉岚蚍⒂芮邢喙兀刂破涑岚蚍⒂耐暾约翱捎眯浴<也病机理和新型药物开发具有积极的意义。.
的生物反应器,它体内的丝腺是一个高效率的蛋白质工厂。舯基因保守选题意义家蚕基因组的研究为家蚕主要性状的分子定位、家蚕分子遗传和基因工程研究提供基础。对不同组织、不同发育时期的重要基因进行克隆测序、基因结拥有多万户蚕农,仍有年产值嘁诘乃砍窆ひ岛褪诿涝5耐饷场我国茧丝的产量和出口量分别占世界总额的%