食品中大肠菌群的测定实验课件.ppt

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——多管发酵法
大肠菌群的概念
◆大肠菌群(coliformbacteria)系指一群在37℃能发酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
◆包括埃希氏菌属、枸橼酸杆菌属、肠杆菌属和克雷伯氏菌属
测定意义
◆大肠菌群作为粪便污染指示菌。即在食品中检出大肠菌群,不仅反映食品被粪便污染总的情况,一定程度上也反映了食品在生产加工、运输、保存等过程中的卫生状况,具有广泛的卫生学意义。
◆凡是大肠菌群数超过规定限量的食品,即可确定其卫生学上是不合格的,该食品使用是不安全的。
◆三管系列:对样品进行连续10倍梯度系列稀释,选择3个连续的合适的稀释度,每个稀释度接种3管到乳糖胆盐发酵管内培养,从规定的反应呈阳性管数的出现率,查取大肠菌群最可能数(MPN)检索表,报告每100mL(g)检样大肠菌群的最近似数。
大肠菌群MPN的检验方法--多管发酵法
大肠菌群的检验程序
稀释
大肠菌群阴性
革兰氏阳性
伊红美蓝琼脂平板
报告
乳糖胆盐发酵管
革兰氏阴性无芽孢
检样
产气
乳糖发酵管
不产气
不产气
大肠菌群阴性
大肠菌群阳性
报告
报告
报告
大肠菌群阴性
革兰氏染色
产气
过程
◆检样稀释
◆乳糖初发酵试验(假定试验)
◆分离培养
◆乳糖复发酵试验(证实试验)
◆报告
检样稀释
:10稀释液1mL,注入含有9mL无菌生理盐水的试管内,振荡混匀,作1:100的稀释液;
,按上述操作依次作10倍递增稀释液,每稀释一次换用1支1mL无菌吸管;
检样稀释
,选3个稀释度,每稀释度接种3管。
每100mL消毒乳中大肠菌群MPN不超过40个
乳糖初发酵试验(假定试验)
◆目的:检查样品中有无发酵乳糖产酸产气的细菌。
◆将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内;
◆乳糖:选择作用,大肠菌群能发酵乳糖产酸产气;
◆胆盐:抑制其它杂菌,特别是革兰氏阳性菌;
◆溴甲酚紫:pH指示剂,细菌产酸后,培养基即由原来的紫色变为黄色,溴甲酚紫还有抑制其他细菌如芽孢杆菌生长的作用。
大肠菌群阳性反应
乳糖胆盐发酵管
产酸产气现象