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Ampicillin(氨卡青霉素)(100mg/ml)
组份浓度100mg/mlAmpicillin
配制量50ml
。
,充分混合溶解后,定容至50ml
。
4•小份分装(1ml/份)后,-20°C保存。
IPTG(异丙基-B-D-硫代半乳糖苷)(24mg/ml)
组份浓度24mg/mLIPTG配制量50mL
。
加入40ml灭菌水,充分混合溶解后,定容至50ml
用022pm过滤膜过滤除菌。
4小份分装(1ml,份)后,-20C保存。
X-Gal(20mg/ml)
组份浓度20mg/mlX-Gal
配制量50ml
-Gal置于50ml离心管中。
(二***甲酰***),充分混合溶解后,定容至50ml。
3•小份分装(1ml/份)后,-20C避光保存。
LB培养基
组份浓度1%(W/V)Tryptone(胰蛋白胨),%(W/V)YeastExtract(酵母提取物),1%(W/V)NaCl
,置于lL烧杯中。
Tryptone
10g
YeastExtract
5g
NaCl
10g
加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。
滴加5NNaOH(),。
加去离子水将培养基定容至1L。
5高温高压灭菌后,4C保存。
TB培养基
%(W/V)
Tryptone
%(W/V)
YeastExtract
%(V/V)
Glycerol
17mM
KH2PO4
72mM
K2HPOa
配制量1L
;中液(,)100ml。
,搅拌溶解后,加去离子水定容至100ml,高温高压灭菌。
,置于1L烧杯中。
Tryptone
12g
YeastExtract
24g
Glycerol
4m
加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。
加去离子水将培养基定容至1L后,高温高压灭菌。
5•待溶液冷却至60°C以下时,,加入100ml的上述灭菌磷酸盐缓冲液。
。
SOB培养基组份浓度
2%(W/V)
Tryptone
%(W/V)
YeastExtract
%(W/V)
NaCl
KCl
10mM
MgCl2
配制量1L
。
,定容至100ml。
配制2MMgCl2溶液。
在90ml去离子水中溶解19gMgCl2后,定容至100ml,高温高压灭菌。
称取下列试剂,置于lL烧杯中。
Tryptone
20g
YeastExtract
5g
NaCl
加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。
量取10m1250mMKCl溶液,加入到烧杯中。
滴加5NNaOH溶液(),。
加入去离子水将培养基定容至lL。
高温高压灭菌后,4C保存。
使用前加入5ml灭菌的2MMgCl2溶液。
SOC培养基组份浓度
2%(W/V)
Tryptone
%(W/V)
YeastExtract
%(W/V)
NaCl
KCl
10mM
MgCl2
20mM
Glucose
配制量100mL
配制方法1•配制1MGlucose溶液。
将18gGlucose溶于90ml去离子水中,充分溶解后定容至100ml。
滤膜过滤除菌。
,均匀混合。
°C保存。
RM培养基
组份浓度
1%(W/V)
YeastExtract
%(W/V)
KHPO
2%(W/V)
Glucose
配制量100mL
%Glucose溶液。
将200gGlucose溶于300ml去离子水中,充分溶解后定容至400ml。。
%Glucose溶液4ml,均匀混合。
。
SDS-PAGE浓缩胶(5%Acrylamide)配方表
抗生素的贮存溶液及其工作浓度
抗生素
贮存液*1
工作浓度
浓度保存条件
严紧型质粒松弛型质粒
氨苄青霉素
50mg/m1(溶于水)
-20°C
20pg/ml
60pg/ml
羧苄青霉素
50mg/mL(溶于水)
-20°C
20pg/ml
60pg/ml
***霉素
34mg/mL(溶于乙醇)
-20C
25pg/ml
l70pg/mL
卡那霉素
10mg/mL(溶于水)
-20C
10pg/ml
50pg/ml
链霉素
10mg/mL(溶于水)
-20C
10pg/ml
50pg/ml
四环素*2
5mg/mL(溶于乙醇)
-20C
10pg/ml
50pg/mL
*。以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理。所有抗生素溶液均应保存于不透光的容器中。
*2镁离子是四环素的拮抗剂,四环素抗性菌的筛选应使用不含镁盐的培养基(如LB培养基)。
各种组份名称
各种凝胶体积所对应的各种组份的取样量
1m12m1
3m14ml
5ml
6m1
8m1
10mL
H刃
30%Acrylamide
17
-HCl()
075
10%SDS
006
10%过硫酸铵
TEMED.
SDS-PAGE浓缩胶(5%Acrylamide)配方表
SDS-PAGE分离胶配方表
各种组份名称各种凝胶体积所对应的各种组份的取样量
5m1
10m1
15m1
20ml
25m1
30m1
40m1
50ml
6%Gel
H2O
30%Acrylamide
30
-HCl()
10%SDS
10%过硫酸铵0
8%Gel
H2O
30%Acrylamide
-HCl(pH88)
10%SDS
10%过硫酸铵
02
04
TEMED
10%GeL
H2O
30%Acrylamide
+HCl()
10%SDS
03
10%过硫酸铵
TEMED
0008
.012
12%GeL
H2O
165
30%Acrylamide
-HCl()
10%SDS
10%过硫酸铵
015
TEMED
15%Gel
H2O
30%Acrylamide
-HCl()
10%SDS
10%过硫酸铵
TEMED
SDS-PAGE浓缩胶(5%Acrylamide)配方表