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我国的乙肝病毒感染率约60%-70%;%。
免疫学方法
酶免疫法(ELISA)
时间分辨荧光分析技术(TRFIA)
胶体金法
分子生物学方法
HBV-DNA法(PCR)
bDNA法
目的:对乙肝血清标志物进行定性的分析
优点:简单、快速、稳定
缺点:敏感度相对较低;出现钩状效应(前带/后带)和受到交叉污染的可能性较大;不能够对乙肝病毒标志物实施动态观察;对低水平HBV感染标志物的漏检率相对较高。
示踪剂:镧系元素
流程:
具有双功能基团的镧系元素对抗原或抗体进行标记
通过时间延迟将非特异性的荧光去除
发生特异性结合时,抗原抗体复合物在可以增强液中发生解离,在特定的激发光的激发作用下发出一种特定波长的荧光,在固定的时间对特异性荧光进行检测即可
意义:适用于急诊或手术前对HBV病毒进行定性检查,其主要优点在于检测速度较快、操作简单方便,对操作技术和检测环境的要求相对较低。
胶体金:由***金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态。
原理:胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是静电结合,所以不影响蛋白质的生物特性。
类型:免疫胶体金光镜染色法
免疫胶体金电镜染色法 
胶体金免疫层析法 等
优点:检测速度相对较快,在取得血清的情况下,一般情况下在十分钟之内就可以对结果进行判读。
缺点:只能对乙肝病毒实施定性检测,准确率与酶联免疫吸附试验比较相对低,且对于弱阳性的表现度相对较差,造成弱阳性标本的漏读和误读的可能性相对较大,性价比跟准确度方面都要略逊于ELISA。
传统PCR
PCR-ELISA
实时定量PCR
HVB-DNA法(PCR)
原理:探针杂交
方法:bDNA是人工合成的侧链DN***段,每个侧链上都可以带标记物。在用于检测的微孔板上包被有一套人工合成的HBV-DNA特异性核苷酸捕获探针,当HBV-DNA从细胞中释放出来时,被板上的捕获探针所捕获。另一套靶向延伸探针既能与捕获的HBV-DNA杂交,又能与预放大探针杂交。随后,放大探针与预放大探针杂交,形成bDNA复合物。标记有多个碱性磷酸酶的探针固定到该复合物上,与发光底物共同孵育,记录发光强度,并根据标准曲线求得HBV-DNA浓度。
意义:目标物不被扩增,但检测信号被放大,从而提高了灵敏度。
bDNA法(branchedDNA)
【1】胡晓丹,目前乙肝病毒不同临床检测方法的对照研究[J].国际病毒学杂志,2015,,-143.
【2】王健,闵福援,乙肝病毒血清标志物的检测方法及其临床意义[J].中华检验医学杂志,2005,,-115.
【3】张宝华,黄婷,乙型肝炎病毒检测方法的相关性分析[J].现代检验医学杂志,2010,,-71.
【4】王家杰,何庆明,刘佳文,李宝玲,李金红,乙型肝炎病毒标志物定量检测方法的评价[J].国际检验医学杂志,2015,,-124.
【5】魏来,乙型肝炎与丙型肝炎病毒感染临床检测的进展[J].2015,,-659.
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