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呼吸作用(hūxīzuòyònɡ)是反应植物生命活动强弱的重要指标之一。常用于植物生理研究及农业生产实践等方面。
有氧呼吸的方程式:C6H12O6+6O26CO2+6H2O
测定CO2释放量的方法:滴定法、红外线CO2分析仪法
测定O2吸收量的方法:氧电极法
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小篮子法测定呼吸速率的原理
在广口瓶中,放入一定量的Ba(OH)2溶液,用其吸收植物材料呼吸过程中释放(shìfàng)的CO2。然后用草酸溶液滴定剩余碱量,由空白和样品二者消耗草酸溶液之差,计算出呼吸过程中释放的CO2量。
反应如下:
Ba(OH)2+CO2 BaCO3+H2O (1)
Ba(OH)2(剩余)+H2C2O4 BaC2O4+2H2O(2)
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实验材料:萌发的小麦和大麦种子
主要实验仪器:
1、广口瓶测呼吸装置:
广口瓶一只,加一只三孔橡皮塞,一孔插入(chārù)装有碱石灰的漏斗,漏斗口塞棉花,将压碎的碱石灰粉末覆盖于棉花上,能吸收进入瓶中的CO2,另一小孔供滴定用,平时用一小橡皮塞塞紧;第三孔插入温度计,记录测定时的温度。瓶盖下面装一小钩,以悬挂小筐,供装植物材料用。
:装草酸
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四、试剂(shìjì)
Ba(OH)2溶液
1/44mol/L草酸溶液:每ml溶液相当于1mg的CO2
-1Ba(OH)2溶液(密封保存),溶液配好后先过滤到试剂瓶中,塞紧试剂瓶,尽量减少溶液曝露在空气中的时间,以减少BaCO3沉淀的产生
酚酞指示剂:1g酚酞溶于100ml95%乙醇中
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五、实验步骤
1、空白滴定:
通过滴定孔向广口瓶内放入Ba(OH)2溶液20ml,加入2滴酚酞试剂。
塞紧小橡皮塞,摇动广口瓶几分钟,使瓶内CO2充分吸收。
待瓶内CO2吸收后,拔出小橡皮塞,把酸式滴定管插入(chārù)小孔中,用草酸滴定,至红色刚刚消失为止。
记下草酸溶液用量的毫升数,即为空白滴定值。
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2、准备植物(zhíwù)材料: 取待测小麦或大麦种子8g(约100粒),在天平上称出重量,装在小篮中。
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3、正式滴定:
(méngfā)的种子
倒出废液,用蒸馏水洗凈广口瓶,重加20mlBa(OH)2溶液于瓶内,将装有待测种子的小篮迅速挂在小钩上,塞紧瓶塞。
方法同上。
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开始记录时间,30分钟后,小心打开瓶塞,迅速取出小篮,立即重新(chóngxīn)盖紧瓶塞,充分摇动2分钟,使瓶内CO2的完全被吸收,从滴定孔中滴入2滴酚酞。其余操作如前,记下草酸用量,即为样品滴定值。
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六、计算呼吸速率
(空白滴定值-样品滴定值)×mgCO2
呼吸速率=
植物(zhíwù)组织鲜重×时间
呼吸速率的单位一般可采用mg(CO2)·g-1FW·h-1,
mgCO2·ml-1草酸=1
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七、注意事项
操作时勿使口中呼出的气体进入(jìnrù)瓶中。
测定期间轻轻地摇动广口瓶,破坏溶液表面的BaCO3薄膜,以利CO2的吸收。
将滴定管轻轻插入橡皮塞中,摇动广口瓶时握住滴定管,以免折断滴定管。
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