文档介绍：农残检测中应注意的问题
样品制备
(1)样本应在冷冻状态下运送和保存,并避免在运送期间解冻,样品储存一般需在–20℃,样品提取浓缩液储存应在0~5℃。通常动植物样品需搅拌或匀浆(籽粒需磨碎过40目筛),土壤样本需去石块等杂物,阴干后充分混匀,过40目筛。
样品检测前需混匀,可用粉碎机搅拌混匀,颗粒尽量小。
粉碎前应保持半冷冻状态,以免待测成份随水分流失。
(2)提取:
⒈用溶剂将待测样品中农药溶解、分离出来的操作步骤。根据样本和待测农药种类,用不同溶剂和方法进行提取。
原理:相似相溶。选择与待测农药极性相似的溶剂,提取剂沸点应45~80℃,且不能与样本发生作用,毒性低,价格便宜,必须能溶解待测农药。采用ECD时,不能选带卤素的溶剂。对含水量高的样本,一般选与水相混溶的溶剂(乙腈、丙酮等),要求溶剂对样本有较强的渗透能力,以便能将样本中农药充分提取。当单一溶剂效果不理想,可选择2种或2种以上不同极性的溶剂,以不同比例配成混合提取剂,溶剂的级性由强到弱顺序:水—乙腈—甲醇—乙酸—乙醇—异丙醇—丙酮—正丁醇—正戊醇—乙酸乙酯—二氯甲烷—三氯甲烷—苯—甲苯—二甲苯—四氯化碳—二硫化碳—环己烷—正己烷(石油醚)。
⒉溶剂纯化:目前我国市售的有机溶剂几乎都需纯化后方可使用。
方法:多采用重蒸馏的方法。纯化后的溶剂检验方法是将溶剂浓缩100倍,吸取1µl注入气相中无干扰峰即符合要求。也可采用中性氧化铝、硅胶、活性炭等吸附剂制成层析柱纯化。
⒊提取方法:①振荡法:在盛有样本的容器中加提取剂,振荡一定时间。
②均质法:用均质机对加提取剂的样本快速均质。快速、简便。
③超声法:样本加入提取剂,以超声波提取。
④索氏提取:提取效果好,但时间长,干扰物多。多用于动物样本。
⑤快速混匀法:适用于液体样品。
一般经三次提取,第一次约提取70-90%,第二次和第三次提取残渣中的剩余部分。无水硫酸钠和氯化钠的盐析作用能提高待测组分的回收率。干性样品(含水量<10%)应加入适量水分再提取,采用乙酸乙酯提取含水量高的样本中农药时需加一定量的无水硫酸钠,提取浓缩菜汁或含糖量高的样本中农药时需加适量水,提取干燥土壤中农药时也需加适量水都能提高提取效果。
(3)净化:将样本中待测农药与干扰杂质分离的步骤。原则是尽量完全除掉干扰杂质,而又使待测农药损失尽量少。
⒈液—液分配:乙腈—正己烷,丙酮—正己烷,丙酮—石油醚。
⒉吸附柱层析:弗罗里硅土、三氧化二铝、硅胶、活性炭、硅藻土等。存于干燥器中。
⒊固相萃取:四步:固定相活化、样品上柱、洗涤和洗脱。
(4)浓缩:
⒈氮吹仪
⒉旋转蒸发仪:水浴温度,蒸发速度,不能蒸干。
(5)定容:一定要准确。
方法评价指标:灵敏度(以方法最低检出浓度表示),准确度(添加回收率表示),精密度(标准偏差)。
⒈精密度:指用某种方法重复测定同一均质样品所得测定值的彼此接近程度,表示分析结果的重复性。常用标准差(SD)或相对标准偏差(RSD)表示。
精密度→重复性重现性
重复性:短期内相同实验条件下(实验室、操作者、仪器型号和试剂批号),对同一样品测定结果的精密度。
重现性:指不同实验条件下使用某种分析方法对同一样品各个独立测定值间的精密度。
(重现性>重复性)