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贵阳学院毕业论文(设计)
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本科毕业论文(设计)
题目:花蓼茎段愈伤组织的诱导以及再生体系
的建立
院系:生物与环境工程学院
专业:生物工程
姓名:
学号:
指导老师:
老师职称:博士
填写日期:2016年4月5日
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诚信承诺书
为了为确保毕业论文写作质量和答辩工作的顺当开展,达到按期圆满毕业的目标。本人严峻 承诺:
1、本人所呈交的毕业论文,是在指导老师的指导下完成的,严格依据学校有关规定完成的。
2、本人在毕业论文引用他人的观点和参考资料均加以注释哈说明。
3、本人承诺在毕业论文选题和争辩内容过程中没有抄袭他人的争辩成果和伪造相关数据等行为。
4、在毕业论文中对侵害学问产权的行为,本人愿担当相应的责任。
论文(设计)作者签名:
日期:2016年4月5日
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目录
头花蓼茎段愈伤组织的诱导以及再生体系的建立 -5-
摘要 -5-
ABSTRACT -5-
Keywords -6-
第一部分文献综述 -6-
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外植体 -10-
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其次部分正文 -12-
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参考文献: -15-
致谢 -17-
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头花蓼茎段愈伤组织的诱导以及再生体系的建立
摘要
头花蓼是贵州少数民族地区常用的草药,具有极大的药用价值和经济价值。本试验以头花蓼无菌茎段为原材料,通过头花蓼种子在无菌环境中萌发出胚芽;胚芽生长成完整植株(无菌苗);无菌苗茎段获得再生植株得的过程。目的是削减培育过程,缩短培育时间,提高组培效率。
试验结果:
(1)胚芽的获得:以头花蓼种子为原料,以MS+2mg/L6-BA++30mg(蔗糖)+9mg(琼脂)为培育基,诱导胚芽萌发;
(2)无菌苗的获得:以(1)中的胚芽为材料,接种到MS培育基中,在光照下培育获得无菌苗;
(3)再生植株的获得:以(2)中的无菌苗为材料,剪切下茎段,接种到MS+2mg/LZT++30mg(蔗糖)+9mg(琼脂)培育基上,培育获得再生植株。
关键词:头花蓼;胚芽;无菌苗;再生植株。
ABSTRACT
PolygonumCapitatumiscommonlyusedherbsinGuizhouMinorityAreas,,thefirstflowerstemsectionPolygonumsterilerawmaterials,throughtheheadPolygonumseedssproutgerminasterileenvironment;germgrowintowholeplants(novaccine);,improvetheefficiencyoftissueculture.
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Results:
(1)germsobtained:thefirstflowersPolygonumseedsasrawmaterial,MS+2mg/L6-BA++30mg(sucrose)+9mg(agar)forthemediumtoinduceembryogermination;
(2)asepticobtained:in(1)thegermofmaterialinoculatedintoMSmedium,andculturedinthelightnovaccine;
(3)RegenerationPlants:A(2)novaccineforthematerial,shearedstem,inoculatedintoMS+2mg/LZT++30mg(sucrose)+9mg(agar)onthemedium,culturedplantregeneration.
Keywords:Polygonumcapitatum;germ;novaccine;regeneratedplants.
第一部分文献综述
头花蓼(Polygonumcapitatum)是蓼科(Polygonaceae)蓼属(Polygonum)多年生草本植物,又名四季红、石莽草、骨虫草等。头花蓼生长在海拔600-3500米的地区,在我国主要分布在江西、湖南、湖北、四川、贵州、广东、广西、云南及西藏等地;在国外主要分布在尼泊尔、不丹、印度、锡金、缅甸和越南等地。头花蓼宠爱生长在阴暗潮湿的环境中,常生在草甸石上,常绿阔叶林中,常绿林中,稻田边,干旱山坡,干旱田中,耕地,沟渠边,河边, 荒地,树林中,路边,墙边,沙滩,山谷,石缝中。头花蓼根系发达,茎匍匐丛生,叶片略带红色,有大量腺毛;叶面上还有有黑褐色新月形斑点;花期长(1-12月),花球红色或粉红色,成片生长时具有良好的景观效果,因此可作为一种园林观赏植物。头花蓼全草均可入药,具有清热、凉血、利尿、止痢的功能;主要治疗膀胱炎、肾孟肾炎、痢疾等季疾病。头花蓼是贵州苗族地区常用的草药,也是贵州着重进展的“六大苗药”之一。贵州威门药业股份有限公司以头花蓼为原料生产“热淋清”颗粒,该颗粒对泌尿系统疾病有独特疗效、服用便利且无毒无副作用等特点,深受东南亚地区人民的欢迎和认同。该公司每年需要上百吨头花蓼用于生产“热淋清”颗粒,然而贵州省头花蓼野生资源有限(隐藏量大约有300000kg),由于常年采摘,自然储量已越来越少。此外,头花蓼也有较高的经济价值(据贵州省施秉县药材价格数据显示,贵州头花蓼鲜活6元/公斤,按每亩400kg产量计算,可比种植玉米增收500-800元)。基于上述
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两点缘由,贵州已开头大面积人工种植头花蓼(例如:施秉县头花蓼GAP种植基地和织金县头花蓼基地)。
随着药材市场需求量的不断增加和头花蓼人工种植面积的不断扩大,掀起了科学试验者们对头花蓼争辩的热潮,头花蓼的争辩正在进入一个全新的时代。争辩的内容有:争辩头花蓼种子种植技术,头花蓼化学成分分析,药用成分争辩,茎尖快速繁育,还有头花蓼茎段组织培育技术,但是关于头花蓼无菌苗茎段争辩的很少。因此,本试验在无菌环境下,通过头花蓼种子消毒灭菌后在光照培育箱中萌发出胚芽;胚芽生长成完整植株(无菌苗);无菌苗茎段培育获得再生植株的过程,建立了头花蓼茎段的再生体系。
,通过长期的科学争辩,植物细胞的全能性和器管分化、体细胞胚胎发育的激素调整得到了证明;植物组织培育技术也有了快速进展。组织培育技术的广泛运用使得植物繁育体系发生了很大的转变。组织培育技术已经成为了人们获得抱负植株最常用的方法之一。组织培育技术可以得到和母本性状保持全都的子代,这在果树培育、濒危植物的连续方面已经得到运用;新品种的开发,也离不开组织培育,例如无籽西瓜。
头花蓼是1959年在铜矿区发觉的生长旺盛的优势草本植物[1];1999年,《贵阳中药现代化科技产业实施方案》颁布以后[2],为头花蓼的深化争辩供应了条件。以头花蓼为原料生产的热淋清药物开头用于尿道炎治疗,疗效显著[3];其后,头花蓼的争辩主要在头花蓼的药用成分分析以及热淋清药物治疗泌尿系统疾病方面[4-6];直到2005年,才有了关于头花蓼种子繁育的报道[7];在之后的10年中,头花蓼的争辩的不断的进展深化到各个方向:
头花蓼叶面上还有有黑褐色新月形斑点,花期长,花球红色或粉红色,成片生长时具有良好的景观效果,因此可作为一种园林观赏植物[8]。2014年,刘明丽,付飞跃和王海洋三人以头花蓼为争辩对象,通过屋顶种植槽,设置实生苗幼苗期3种不同水分及成苗期6种不同水肥处理,对比分析其适应性,:幼苗期,头花蓼在900mL的浇水量下,生长最佳,经受30d,叶片大小稳定;成苗期,头花蓼在浇水1600mL施氮肥处理下,生长最佳;头花蓼植株80d成坪,种群平均盖度为91%,花期持续时间为240d,可作为屋顶绿化地被材料
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[9];韦美玉和赵洪对野生头花蓼形成的景观效果进行争辩,发觉它的茎、叶、芽、花等具有较高的观赏价值,可作为花卉开发利用[10]。
2000年,李勇军,王永林,胡昌奇等人对头花蓼的黄***类物质进行争辩,首次在头花蓼中分别出了槲皮素、槲皮苷、陆地棉苷和槲皮素-3-O-(2″没食子酰基)-鼠李糖苷[11];许乾丽对头花蓼和头花蓼制剂进行争辩,发觉了主要有效活性成分是没食子酸[12];2003年,张丽艳、杨玉琴和高言明等人对不同产地、不同季节头花蓼的黄***含量进行测定,结果显示不同采收期的的头花蓼中总黄***含量差异明显,在8月和9月含量最高[13];2005年,赵德刚、刘世会和高玉琼等人对头花蓼挥发性成分争辩,分别出88个成分,确定了51个化合物,%[14];赵叶,张开霞,刘军等人对头花蓼水提取物化学成分进行争辩,结果分别鉴定了15个化合物,分别为龙胆酸、原儿茶酸、没食子酸甲酯、木犀草素、儿茶素、水飞蓟宾、大豆苷、杨梅苷、芦丁、槲皮素、槲皮苷、五味子苷、山柰酚、尿嘧啶、苯丙氨酸。其中龙胆酸、没食子酸甲酯、木犀草素、大豆苷、尿嘧啶、苯丙氨酸为首次从头花蓼中分别得到[15]。
2003年,贵州省启动中药现代化产业种植基地、2004年贵州全力打造中国药谷的期刊发布以及贵州威门药业生产的热淋清药物在治疗泌尿系统疾病取得的良好效果[16-18],推动了贵州省头花蓼的现代化、产业化进展,同时也加快了科研人员对头花蓼快速繁殖争辩的步伐。2006年,王新村和孙长生等人通过对影响头花蓼种子育苗的因素(育苗基质、覆土厚度、播种方法、播种后保温保湿措施等)进行系列试验争辩,提出了头花蓼种子育苗的可行方法,并争辩制订了种苗质量标准[19];吕小梨、赵致、王华磊对头花蓼种子发芽条件(温度、盐胁迫和培育方式)的争辩,得出在种子15摄氏度时发芽率最高,在同一温度条件下光培育比暗培育发芽率高,纸间比纸上发芽率高的结论[20];孙长生,韩见宇,魏升华等人也对头花蓼种子