分子医学实验方法.ppt

文档介绍：如何在体外表达一个基因?
如何检测一个基因的表达?
如何在体外表达一个基因?
如何在体外表达一个基因
基因的获取
基因的克隆——重组DNA技术
基因的表达
基因产物的鉴定
表达产物的纯化
获取目标基因常常是基因操作的首要步骤。常规方法有PCR法,基因组文库或cDNA文库法以及化学合成法。应根据具体的研究目的和实验条件选用合适的方法。
基因的获取
获取基因的序列
在获取基因之前如果能知道基因的序列将使这一过程变得非常方便。
人类基因组数据库提供了所有已知基因的序列。
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化学合成法
较短的基因(<100 base)
用途:PCR引物
测序引物
定点突变
核酸杂交探针
基因组文库
限制性内切酶
……
克隆、转化、培养、鉴定
基因组DNA
基因组文库
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PCR