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(1)DNA提取的原理:DNA在NaCl溶液中的溶解度,随着NaCl浓度的变化而改变。,利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。
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【实验链接】鸡血细胞中的DNA主要位于鸡血细胞核中,通常先向鸡血细胞液中加入蒸馏水,并搅拌,使细胞膜和核膜涨破,将DNA释放出来,然后用较高浓度的NaCl溶液溶解,再加入蒸馏水降低NaCl溶液的浓度,使DNA析出。
(2)DNA纯化的原理:DNA不溶于酒精,而细胞中某些物质可溶于酒精,从而可提取出含杂质较少的DNA。
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(2)DNA纯化的原理:DNA不溶于酒精,而细胞中某些物质可溶于酒精,从而可提取出含杂质较少的DNA。
【实验链接】实验中选用预冷的95%的酒精效果更好,除上述提取方法以外,还可以用苯酚,使蛋白质变性,抑制核酸酶的活性,通过离心分层后,DNA溶于上层水中,蛋白质变性存在于苯酚层中,使二者分开。
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(1)材料:鸡血
实验中用鸡血作为实验材料有三个原因:一是鸡血中血细胞含量高,DNA含量丰富;二是材料易得;三是鸡血细胞极易吸水涨破。
(2)器具
本实验过程中最好使用塑料烧杯和试管。因为玻璃表面带电荷,DNA中的磷酸基也带电荷,因而易被吸附于玻璃表面,故实验中用塑料烧杯和试管可减少DNA的损失。
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(3)试剂
在DNA鉴定中所用的二苯***是一种有毒性的试剂,在使用时注意不要让药液接触到皮肤或身体的其他部位,也不要近距离观察。
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(1)加入抗凝剂的目的
制备鸡血细胞液时要在取新鲜鸡血的同时加入抗凝剂,防止血液凝固。
(2)实验中几次重复操作的目的
①实验中有两次使用蒸馏水
,目的是使血细胞吸水涨破;
,目的是为了稀释NaCl溶液,析出DNA。
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②实验中有三次过滤
过滤时使用纱布层数与取其滤液或丝状物有关。第1、3次要其滤液,使用纱布为1~2层,第2次是要滤出丝状物,使用纱布为多层。目的都是为了获取较多的实验材料。
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