文档介绍：沙枣花超临界二氧化碳萃取物清除自由基的研究
张振华,俞维, 王基云, 王晶霞, 王妍
【摘要】目的通过DPPH·法测定沙枣花超临界萃取物各组分的清除自由基的能力。方法采用超临界CO2萃取技术对沙枣花进行萃取,对萃取物依次用石油醚,醋酸乙酯,正丁醇进行萃取,通过DPPH法测定分离釜I和分离釜II的萃取物各组分的清除自由基的能力,进行定性和半定量的研究。结果分离釜II总的萃取物的清除能力明显大于分离釜I总的萃取物的清除能力,但是分离釜I的经石油醚萃取后的水层,醋酸乙酯层,正丁醇层,经醋酸乙酯和正丁醇萃取后的水层的清除能力分别大于了分离釜II各组分的清除能力。结论沙枣花超临界萃取物各组分对DPPH·均具有一定清除作用,且与体积浓度呈量效关系。
【关键词】沙枣花; 超临界二氧化碳萃取; DPPH·
Abstract:ObjectiveTo study the scavenging activity of supercritical CO2 extract of floed by ligroin,acetidin and n-butanol in turn,and the method of DPPH iquantitative scavenging activity by other parts of extracts of extracted caldron Ⅱ e concentration.
Key in ,动态萃取120 min 。从分离釜I (压力10 MPa ,温度55 ℃) 接收分离物I ml,标记为总萃取物1;从分离釜II (压力5 MPa ,温度30 ℃) ml,标记为总萃取物2。
各组分的制备将总萃取物1倒入分液漏斗中,加入等体积的石油醚进行萃取,充分振荡,放置分层后,得到下层水液,同法再次萃取,最后的水层标记为水层1,保存石油醚层。同法对总萃取物2进行萃取,最后水层标记为水层2,保存石油醚层。
量取5 ml的水层1于分液漏斗中,加入等体积的醋酸乙酯进行萃取两次,合并,得到醋酸乙酯层,自然挥发至5 ml,标记为醋酸乙酯层1;剩余水层中加入等体积的正丁醇萃取两次,合并,得到正丁醇层10 ml, 自然挥发至5 ml,标记为正丁醇层1,最后剩余水层标记为萃后水层1。
量取5 ml的水层2于分液漏斗中,加入等体积的醋酸乙酯进行萃取两次,合并,得到醋酸乙酯层, 自然挥发至5 ml,标记为醋酸乙酯层2;剩余水层中加入等体积的正丁醇萃取两次,合并,得到正丁醇层, 自然挥发至5 ml,标记为正丁醇层2,最后剩余水层标记为萃后水层2。
DPPH·标准曲线的制作准确称取〔DPPH·〕 mg,用甲醇定容到100 ml,×10-2mg/ml的标准溶液,置冰箱中备用(现用现配)。分别取0,2,4,6,8,10 ml标准溶液,用甲醇定容至10 ml,最终质量浓度分别为0,5,10,15,20,25
μg/ml。测定上述标准溶液在515 nm波长处的吸光度,制作标准曲线(见图1)。其线性回归方程为:
Y= 4X+2E-16,R2= 7
清除DPPH·的测定方法DPPH·在有机溶剂中