文档介绍：03沙门菌
沙门菌
1简述
沙门菌属是肠杆菌科的重要致病菌,按《Bergey系统细菌学手册》第一卷(1984),沙门菌分5个亚属,2003年出版的第八版的《临床微生物手册》将沙门菌属分成两个菌种及肠炎沙门菌和乍得沙门菌,其中的肠炎沙门菌粉6个亚属,包括常见的伤寒、甲型副伤寒、乙型副伤寒、丙型副伤寒、鼠伤寒,猪霍乱等沙门菌在内,当时已发现2501个血清型。O抗原抗血清的A-E群包含了沙门菌分离株的95%,所以用沙门菌A-FO多价血清进行沙门菌初筛试验。药品中的沙门菌,是以鉴定沙门菌属为准,即对每10g(或10ml)药品中是否检出沙门菌作出检验报告。
由于沙门菌血清型繁多,各血清型的生化及血清特性虽密切相关,却不尽相同,采用一种增菌培养基和两种分离培养基,不可能涵盖所有沙门菌的最适增菌及分离条件。此外,由于药品在生产过程中,常受到加热、干燥等加工步骤的影响,药品中污染的沙门菌可受到损伤或呈休眠状态,故须在增菌培养前先进行预增菌,然后再进行增菌及分离、三糖铁琼脂初步鉴别、生化试验、血清学试验等步骤。 2仪器、设备及用具(见大肠埃希菌检查法2)
3试液指示液(参见大肠埃希菌检查法)
***化钾试液
~F“0”多价血清(0多价1)
(EMB)
()
(TTB)
(TSI)
(DHL)
()
(尿素)琼脂培养基
***化钾培养基
5. 对照用菌液
阳性对照用菌液取乙型副伤寒沙门菌[(B)50094]培养少许,接种至10ml营养肉汤培养基内。30~35℃培养18~24h后,
无菌***化钠溶液按10倍递增稀释浓度相当于10-100cfu/ml,作阳性对照用菌液。其菌液浓度可用平板菌落计数法测得。
6 .操作方法
准备工作:[见细菌、霉菌(酵母菌)计数6]
增菌培养
取营养肉汤培养基3份,每份200ml,1份加入10g或10ml供试品,混匀1份加入供试品及阳性对照菌(10~100cuf),混匀;1份加入稀释剂10ml作阴性对照,30~35℃培养18~24h后观察。摇动阴性对照瓶后应清亮透彻,无菌生长。
,分别吸取1ml接种于1管含10ml四硫磺
酸钠亮绿培养基的试管中,培养18~24h。
,分别以接种环沾取1~2环培养液接种于胆盐硫乳脂(DHL)或沙门菌志贺菌琼脂(SS)平板及曙红亚甲蓝(EMB)琼脂或麦康凯琼脂平板各1个,倒置培养24~48h,必要时延长至40~。沙门菌在上述平板上的菌落形态特征见下表。
表3 沙门菌的菌落特征
2落中心