文档介绍：09T-I604-01薄层色谱法(二部)检验标准操作规程
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文件类别:技术标准 1/4
1. 目的:建立薄层色谱法(二部)检验标准操作规程,并按规程进行检验,保证检验操作规范化。
2. 依据:
. 《中华人民共和国药典》2010年版二部。
3. 范围:适用于所有用薄层色谱法(二部)测定的供试品。
4. 责任:检验员、质量控制科主任、质量管理部经理对本规程负责。
5. 正文:
. 简述:薄层色谱法系将供试品溶液点样于薄层板上,经展开、检视后所得的色谱图,与适宜的对照物按同法所得的色谱图作对比,用于药品的鉴别或杂质检查的方法。
. 仪器与材料。
. 薄层板。
. 自制薄层板:除另有规定外,玻璃板要求光滑、平整,洗净后不附水珠,晾干。最常用的固定相有硅胶 G、硅胶 GF254、硅胶 H和硅胶 HF254,其次有硅藻土、硅藻土 G、氧化铝、氧化铝 G、微晶纤维素、微晶纤维素 F254 等。其颗粒大小,一般要求粒径为 5~40μ
m。
. 薄层涂布,一般可分为无黏合剂和含黏合剂两种。前者系将固定相直接涂布于玻璃板上,后者系在固定相中加入一定量的黏合剂,一般常用 10%~15 %煅石膏(CaSO4·2H2O 在 140℃加热 4小时),混匀后加水适量使用,或用羧甲基纤维素钠水溶液(%~%)适量调成糊状,均匀涂布于玻璃板上。使用涂布器涂布应能使固定相在玻璃板上涂成一层符合厚度要求的均匀薄层。
. 商品薄层板:分普通薄层板和高效薄层板,如硅胶薄层板、硅胶 GF254 薄
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层板、聚酰胺薄膜和铝基片薄层板等。高效薄层板的粒径一般为 5~7μm。
. 点样器:同纸色谱法项下。常用具支架的微量注射器或定量毛细管,应能使点样位置正确、集中。
. 展开容器:应使用适合薄层板大小的玻璃制薄层色谱展开缸,并有严密的盖子,底部应平整光滑,或有双槽。
. 显色剂:见各品种项下的规定。可采用喷雾显色、浸渍显色或置适宜试剂的蒸气中熏蒸显色,用以检出斑点。
. 显色装置:喷雾显色要求用压缩气体使显色剂呈均匀细雾状喷出;浸渍显色可用专用玻璃器皿或用适宜的玻璃缸代替;蒸气熏蒸显色可用双槽玻璃缸或适宜大小的干燥器代替。
. 检视装置:为装有可见光、短波紫外光(254nm)、长波紫外光(
365nm)光源及相应滤片的暗箱,可附加摄像设备供拍摄色谱用,暗箱内光源应有足够的光照度。
. 操作方法。
. 薄层板制备。
. 自制薄层板:除另有规定外,将1份固定相和3份水在研钵中按同一方向研磨混合,去除表面的气泡后,倒入涂布器中,在玻璃板上平稳地移动涂布器进行涂布(厚度为 ~),取下涂好薄层的玻璃板,置水平台上于室温下晾干后,在 110℃活化 30 分钟,即置有干燥剂的干燥箱中备用。使用前检查其均匀度(可通过透射光和反射光检视)。
. 商品薄层板:临用前一般应在 110℃活化 30分钟。聚酰胺薄膜不需活化。铝基片薄层板可根据需要剪裁,但须注意剪裁后的薄层板底边的硅胶层不得有破