文档介绍：中国农业科学院
硕士学位论文
博莱霉素发酵培养基及发酵条件优化研究
姓名:闫丽
申请学位级别:硕士
专业:微生物学
指导教师:朱昌雄
20060601
磅问觚时间:歹影年∥月矽日独创性声明关于论文使用授权的声明≯C艿难宦畚脑诮饷芎笥ψ袷卮诵∥月如日本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证时间:凇本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:力日学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。论文作者签名:导师签名:时间:,口口占年
的轮枝链霉菌平阳变种鲇。靠趙埘緑譊Ⅲ喈朝加.├趁顾氐那疤逍в液中加入博莱霉素氐的末端胺基,却产生了博莱霉素魁。仍只有痕迹量罹龋唤霉素氏组分与博莱霉素结构完全相同,.├趁顾氐姆⒔基合成;杀彼帷⒁宜峒凹琢虬彼峒谆分子合成;蛴分子的丙氨酸和分子的半胱氨酸合成。谘芯磕┒税坊锖铣墒狈⑾衷诓├趁顾氐姆⒔凸讨屑尤氩├趁顾谹哪┒税坊胏标记峁吮昙橇说牟┎嗣顾谹此研究证明胺类物质可结合进入博莱霉素的末端胺基部分盼睦颍。在抗生素生物合成中产生菌用来合成抗生素分子而本身又没有显著改变的物质。称为前体培国,G疤宄苯硬斡肟股氐纳锖铣赏猓谝欢ㄌ跫禄箍刂凭搴铣煽股氐姆较和增加抗生素的产量。在博莱霉素发酵培养基中加入天然或非天然博莱霉素的末端胺,可以抑制其它天然博莱霉素的生成,并生成包含该种末端胺的新的博莱霉素产物。往博莱霉素发酵液中加入培罗霉素前体以产生培罗霉素就是基于这一原理。胺基烷基衍生物如胺、胍、锍等也可以结合至博莱霉素成为末端胺基团;这说明在博莱霉素的生产途径中,可以使用不同的末端胺对不同的博莱霉素进行生物合成盼睦颍。已有资料显示加入博莱霉素的非天然末端胺基抑制了其它天然博莱霉素成分的产生,这种前体效应也存在于其它的天然博莱霉素成分中。但例外的是、—及,博莱霉素及—的末端胺基不能结合进入博莱霉素分子,而发酵文珊,许鸿章,K怨舛圆├趁顾谹两裎醇猩钊胙芯亢涂7⒌%以上,这表明了我国的菌种具有与日本菌种不同的特点,这个特点也成为我们对其进行开发研究的基础。发酵即借助微生物大量繁殖并积累特定代谢产物的现象仔惴宓龋。博莱霉素发酵为多组分发酵,提高其发酵水平的重要途径是选择合适的培养基和发酵工艺条件以及前体。发酵培养基是博莱霉素产生菌生长、繁殖、代谢和合成博莱霉素的营养物质。培养基的组成和元素的配比对菌体生长发育、发酵单位、提炼工艺及抗生素成品的产量和质量有相当大的影响闻喙。发酵过程中,博莱霉素侧链的形成需要胺基类化合物的参与,研究发现不同的氮源,由于所含的胺基类物质的种类和比例各不相同,所产生的博莱霉素的组份和比例也有所不同盼睦颍。发酵工艺条件包括种龄、接种量、转速、摇瓶装量、及补料等。在博菜霉素发酵中,种龄是一个比较重要的参数,应选择处于生命力旺盛指数生长期的菌体,种子培养时间太短,菌体太少·会使发酵周期延长;种子培养时间太长,则菌体易衰老,影响发酵产素单位闻喙:已有资料显示目前在博莱霉素发酵中其斜面培养时间以臁⒅至为宣盼睦颍。大多数抗生素的最适接种量为%,有时可加大到%一%,也有的抗生素采用小接种量较中国农业科学院硕士学位论文第一章绪论
删卤螅籈舯№,可将博莱霉素在复合物中的含量提高到嘏炀,⒔陀呕刂萍际築缸。以此理论为指导,梅蛉霉素的发酵水平在⒔凸拗谐博莱霉素是广谱,低毒的抗肿瘤药物,对恶性淋巴瘤、头颈部癌、乳腺癌和食道癌有良好的疗效,值得一提的是其W榉郑司哂杏氩├趁顾叵嗤目沽銎淄猓胪嗟牟├趁顾刈蹇股素相比,它的肺毒性最低,且对心、肝、肾无害,尤其不损伤人体自身的免疫功能和骨髓造能,还对发病率高,又无有效药物治疗的肝癌有较满意的疗效。因此提高博莱霉素组分在发酵液中的含量具有非常重要的意义蠲龋。研究发现我国土壤中筛选出来的菌种经过选育、优化后得到的轮枝链霉菌平阳新种其天然产生的产物中组份即可达%以上,表明了我国的博莱霉素产生菌所具有的重要特点。若向发酵开发博莱霉素的单组份提供基础,此外还应深入考察前体物加入法的具体方式和最佳用量以及与其它相关因素的关系。另外对博莱霉素基因工程菌以及博莱霉素与酶概念关系的研究在理论