文档介绍：王晓杜
浙江农林大学
第十章免疫学检测技术
利用免疫学原理建立的检测技术,主要应用于对多种免疫性疾病(感染性疾病、免疫缺陷病、超敏反应、自身免疫病、免疫增殖病、移植排斥反应和肿瘤等)的诊断、疗效评估、发病机制探讨、以及对抗原性物质或免疫细胞的定性、定量,对细胞因子、粘附分子及细胞受体的检测等。
第一节抗原或抗体的检测
抗原-抗体直接反应包括沉淀反应、凝集反应、溶解反应、补体结合反应和中和反应等。抗原-抗体反应可用已知的特异性抗体检测未知的抗原;也可用已知的抗原检测未知的抗体。
免疫荧光技术、免疫酶技术、同位素标记技术、发光免疫分析等免疫标记技术提高了抗原抗体反应的敏感性。
抗原-抗体反应的特点
-抗体的结合是特异性结合
特异性结合阶段
可见的反应阶段
象,于两者的分子比例密切相关
抗原抗体比例对反应现象的影响
抗原-抗体反应受多种因素影响
1 电解质:抗原-%的氯化钠作为稀释液,以供给适应浓度的电解质。
2 温度:一般常使用反应在37度水浴或孵育箱中进行。
:抗原-抗体反应适应的酸碱度为PH6~8。
抗原抗体的检测方法
凝集反应
沉淀反应
补体溶血反应和补体结合反应
中和反应
用标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应
凝集反应 (Agglutination)
细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后形成凝集现象,称为凝聚反应。
1、直接凝集:将细菌或红细胞与相应的抗体直接反应,出现细菌凝集或红细胞凝集现象。又分为玻片法和试管法。
2、间接凝集:将可溶性抗原包被在红细胞或乳胶颗粒表面,与相应抗体反应出现颗粒凝集现象。
血球凝集
沉淀反应 (Precipitation)
血清蛋白质、细胞裂解液或组织浸液等可溶性抗原与相应抗体结合后出现沉淀物,这一类反应称为沉淀反应。沉淀反应可在液体中进行,如絮状沉淀。大多沉淀反应是用半固体琼脂凝胶为介质,进行琼脂扩散故也称免疫扩散。