文档介绍：DNS法测还原糖
3,5-二硝基水杨酸溶液与还原糖溶液共热后被还原成棕红色的氨基化合物,在一定范实验围内反应的还原糖的量和棕红色物质颜色深浅的程度成一定比例关系,可测定生成化合物的吸光度,由标准曲线反推出还原糖的浓度。操作简便,快速,杂质干扰较少,适于生物制氢中还原糖含量的测定。
显色条件包括:
波长选择,显色剂用量,显色时间,溶液酸度,显色温度,有机络合物的稳定性及共存离子的干扰等。此次实验选择波长选择,显色剂用量,显色时间,溶液酸度进行实验。
DNS试剂:, 加热, 3,5-二硝基水杨酸(DNS),另配制2mol/lNaOH溶液,,,蒸馏水定容至100ml,该试剂避光保存7~10天。
葡萄糖标准溶液(*10-2mol/l):,待溶解后定容至100ml容量瓶中。
葡萄糖标准溶液(*10-3mol/l):取10ml上述10-2mol/l溶液,稀释至100ml容量瓶中。葡萄糖标准溶液(*10-4mol/l):取10ml上述10-3mol/l溶液,稀释至100ml容量瓶中。
1. 波长选择取5支试管按下表加相应溶液,沸水浴15min, 均加入7ml水定容为10ml,流水冷却,在不同波长处分别进行扫描。
图1为不同条件下溶液的波长——吸光度图(水调零)。由图1可以看出白色与绿色曲线几乎重合,,用比色法很难区分,。
由DNS+H2O曲线可以看出当波长大于530nm时,DNS的吸光度已经很小,这时DNS对
45℃水浴加热,同时补加水300ml,不断搅拌,,冷却至室温后,,储存在棕色瓶中,,有效期为6个月.
DNS试剂(二)
只有3,5-二硝基水杨酸,氢氧化钠,酒石酸钠钾三种物质。
PS:网上找的,有抄袭嫌疑,不用给币了:D
其中酚为蛋白质变性剂,具有强腐蚀性,不同配方用量也不一样,若用,当小心,,, hitzbz (站内联系TA)
1. -300ml去离子水
2. 配制2mol/l NaOH 溶液 325ml
3. 45g 甘油(丙三醇)
三者混合定容至1000ml即可。
标线做法:
标液浓度:
,,02,,,,,,,, ml标液
与一定量的去离子水,
,沸水10min
冷却后,
,测定即可得标准曲线
DNS溶液测糖含量
分类:实验基础知识
10:20 作者:sunsaley | 评论:0 | 阅读:2451
仪器和设备
分析天平:感量。.