文档介绍：实验四 小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬实验
细胞的胞吞胞吐是细胞进行新陈代谢的方式之一。高等动物的细胞在摄取营养物质的同时,有的细胞如单核细胞和巨噬细胞还有通过识别与吞噬细菌、病毒等外来物质的作用来达到机体防御的功能。本实验通过预先激活腹腔巨噬细胞,然后腹腔注射鸡红细胞,从而引起腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞。通过光镜可清楚地观察到这一有趣的现象。
实验简介
目的要求
基本原理
高等动物体内的巨噬细胞、单核细胞和嗜中性粒细胞,具有吞噬的功能。它们广泛分布在组织和血液中,在机体的非特异免疫功能中起着重要的作用。当病原微生物或其它异物侵入机体时,能招引巨噬细胞,而巨噬细胞又具有趋化性,它通过产生活跃的变形运动,主动向病原体和异物移行聚集,首先把异物吸附在细胞表面,随之,吸附区域的细胞膜向内凹陷,伸出伪足包围异物,并吞入胞质,形成吞噬泡,继而在细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡融合,形成吞噬溶酶体,把病原体杀死,异物消化分解。
血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。根据白细胞的细胞质
内是否含有特殊颗粒,把白细胞分为有粒、无粒两类。含有
颗粒的白细胞为粒细胞,按瑞色染色时所染成的不同颜色分为
中性、嗜酸性和嗜碱性三种粒细胞。无粒白细胞又分为淋巴
细胞和单核细胞。
白细胞5000~10000/ml个。嗜中性粒细胞数量最多,占50~70%
常穿出血管,聚集于炎症组织的周围,作变形运动,吞噬细菌。
体内有炎症时,它的数量就增多。嗜酸性粒细胞数量最少。淋巴
细胞与免疫有密切关系,患结核病时,淋巴细胞明显增加。单核
细胞是血液中最大的细胞,变形活动非常活跃,能吞噬细菌和
异物。单核细胞穿出血管到结缔组织中可变为巨噬细胞。
嗜酸性粒细胞具有粗大的嗜酸性颗粒,颗粒内含有过氧化物酶
和酸性磷酸酶;嗜碱性粒细胞中有嗜碱性颗粒,内含组织***、
肝素与5-羟色***等生物活性物质;中性粒细胞具有变形运动和
吞噬活动的能力。
噬碱性粒细胞
噬酸性粒细胞
噬中性粒细胞
淋巴细胞
单核细胞
实验用品
:显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、注射器、载玻片、盖玻片、吸管等
:
%生理盐水;阿氏(Alsever)血液保存液;6%的淀粉肉汤。
:小白鼠;1%鸡红细胞悬液
方法与步骤
鸡翼下静脉取血后,用Alsever以1:4比例保存于4度(可保存一周)。实验前加生理盐水离心两次,然后根据获得的红细胞的体积加入适量的生理盐水,调至鸡红细胞浓度为1%。
实验前1天,向小鼠腹腔注射1ml淀粉肉汤(预先激活腹腔巨噬细胞:诱导腹腔内产生较多的巨噬细胞),实验前30分钟,向腹腔内注射1ml1%的鸡红细胞。
淀粉肉汤为异物,
但是无毒害,可刺
激小鼠巨噬细胞的
产生,并且淀粉肉
汤里含有台盼蓝,
巨噬细胞吞噬后会
被染成蓝色,便于
观察。
注射后30分钟,处死小鼠。
(右手抓住鼠尾,用力向后拉,左手拇指与食指同时向下按住鼠头,使脊髓与脑髓间断开)
吸取腹腔液