文档介绍：亚***盐的测定
盐酸萘乙二***法测定亚***盐的含量
样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后,在弱酸性条件下,亚***盐与对氨基苯磺酸(H2N—C6H4-SO3H)重氮化,产生重氮盐,此重氮盐再与偶合试剂(盐酸萘乙二***)
偶合形成紫红色染料,其最大吸收波长为550nm,测定其吸光度后,可与标准比较定量。
2HCl+NaNO2+H2
3H--Cl-SO
3H+NaCl+2H2O
盐酸萘乙二***
-N-N--
+Cl
-N3H
SO
3H+HCl
①小型粉碎机。
②分光光度计。
③25ml具塞比色管。
①***化铵缓冲溶液:在1 000ml容量瓶中加人500ml水,,振荡混匀后,再准确加入50ml氢氧化铵,用水稀释至刻度。~。
②硫酸锌溶液():称取120g硫酸锌(ZnSO4·7H2O),用水溶解,并
稀释至1000ml。
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③氢氧化钠溶液(20g/L):称取20g氢氧化钠用水溶解,稀释至1 000ml。④对氨基苯磺酸溶液:称取10g对氨基苯磺酸,溶于700ml水和300ml冰乙酸中,置棕色瓶中混匀,室温保存。
⑤盐酸萘乙二***溶液(1g/L):***,加60%乙酸溶解并稀释至100ml,混匀后,置棕色瓶中,在冰箱中保存,1周内稳定。
⑥显色剂:临用前,将盐酸萘乙二***溶液(1g/L)和对氨基苯磺酸溶液等体积混合。仅供1次使用。
⑦亚***钠标准储备液:***钠,用水溶解后移入500ml容量瓶中,加100ml***化铵缓冲溶液,用水稀释至刻度,混匀,在4℃避光保存。此溶液每毫升相当于500μg的亚***钠。
⑧亚***钠标准使用液:临用前,吸取亚***,置于100ml容量瓶中,加水稀释至刻度,混匀。此溶液每毫升相当于
***钠。
()经绞碎混匀的样品,置于250ml烧杯中,加。70ml水和12ml氢氧化钠溶液(20g/L),混匀,用氢氧化钠溶液(20g/L)调样品pH至8,定量转移至200ml容量瓶中,加l0ml硫酸锌溶液,混匀。如不产生白色沉淀,可再补加2~5ml氢氧化钠溶液,搅拌混匀。置60℃水浴中加热10min,取出后冷至室温,加水至刻度,混匀。,用滤纸过滤,弃去初滤液20ml,收集滤液备用。
***盐标准曲线的绘制
、、、、、、***钠标准使用液(、、、、、、***钠),分别置于25ml具塞比色管中。***化铵缓冲溶液,%的乙酸,,加水至刻度,混匀,在暗处静置25min,用1cm比色杯(灵敏度低时可换2cm比色杯),以零管调节零点,于波长550nm处测吸光度,绘制标准曲线。