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果蔬成分的生化分析
实验一果蔬中维生素C的定量测定(4学时)
实验二果蔬中总糖及还原糖含量的测定(4学时)
实验三果蔬中蛋白质含量的测定(4学时)
实验四果蔬中过氧化物酶分析(12学时)
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实验材料:
冬枣+柚子——1~4组
梨(2个品种)——5~8组
盘菜+萝卜——9~12组
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实验二果蔬中总糖及还原糖含量的测定
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一、目的
掌握总糖和还原糖含量的测定方法。
学****分光光度计的原理和操作方法。
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二、原理
总糖是指样品中的还原单糖及在本实验条件下能水解成还原单糖的蔗糖、麦芽糖和可部分水解成葡萄糖的淀粉。
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多糖为非还原糖,可用酸将没有还原性的多糖和寡糖彻底水解成具有还原性的单糖,再利用还原糖的性质进行测定,这样就可分别求出总糖和还原糖的含量。
蒽***比色法是一个快速而简便的定糖方法。其原理:糖类在较高温度下可被硫酸脱水成糠醛或糠醛衍生物,再与蒽***缩合成蓝色化合物,在620nm处有最大吸收。
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三、实验器材
1、植物材料
2、吸管(×2、×2、
×2、×2、×2)
3、试管(×15cm×7)
4、分光光度计
5、水浴锅、电炉
6、电子分析天平
7、容量瓶(100mL×1)、玻璃漏斗
8、量筒、研钵、三角烧瓶
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四、实验试剂
1、蒽***试剂:取2g蒽***溶于1000mL体积分数为80%的硫酸中,当日配制使用。
2、标准葡萄糖溶液():称取100mg葡萄糖,溶于蒸馏水并稀释至1000mL(可加几滴甲苯作防腐剂)。
3、6mol/LHCl溶液
4、20%NaOH溶液:称取20gNaOH固体,溶于蒸馏水并稀释至100mL。
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五、操作
1、葡萄糖标准曲线的绘制:
取洁净试管6支,按下表进行操作:
0
1
2
3
4
5
标准葡萄糖溶液/mL
0

蒸馏水

置冰水浴中5min
蒽***试剂

煮沸10′,冷却后室温放置10′,在620nm处比色
A620nm
步骤
管号
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以吸光度为纵坐标,各标准液浓度(mg/mL)为横坐标做图得标准曲线。
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