文档介绍：急性子提取物抗氧化活性的体外研究
【摘要】目的研究急性子提取物的体外抗氧化活性。方法提取急性子水溶性物质和脂溶性物质,并将脂溶性物质用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇递次萃取,然后将各提取物分别进行抗卵黄脂质过氧化及消除氧自由基活性的考察。结果急性子醋酸乙酯提取物对卵黄脂质过氧化抑制率能达到90 %以上,对氧自由基抑制率能达到70 %以上,明显高于Vc。结论急性子醋酸乙酯提取物具有很好的抗氧化作用。
【关键词】急性子抗氧化体外
自由基是引起癌症、衰老、心血管病等退变性疾病的根源,生物体内常见的自由基有超氧阴离子自由基、羟基自由基、烷氧基自由基等,其中超氧阴离子自由基形成最早,清除了超氧阴离子自由基,即可从根本上预防体内形成过多的羟基自由基和其他活性氧自由基,达到防衰老、抗癌、抗心血管病的目的〔1〕。急性子为凤仙花科植物凤仙花Impatiens balsamina的干燥成熟种子,夏秋种子即将成熟时采收。急性子具有软坚消积、降气行癖、透骨通筋活血的作用。急性子还有一定的抗癌作用,药敏试验证实对胃淋巴肉瘤细胞敏感〔2〕。本文首次研究了急性子抗卵黄脂质过氧化作用、消除氧自由基的能力并测定了其还原力,体外实验证明急性子具有抗氧化作用,定性鉴别表明其含有黄***类化合物多碳化合物。本实验为急性子资源的开发利用奠定了基础,并为急性子天然抗氧化剂的开发提供了理论依据。
1 材料与仪器
材料来源
急性子购于同仁堂沈阳中街店,经鉴定为Semen impatientis。
试剂与仪器
仪器主要有数字恒温水浴锅,低速离心机,循环水式多用真空泵,电子天平,电热干燥培养箱,旋转蒸发仪。所用试剂均为国产分析纯。
2 方法
急性子中物质的提取
急性子中脂溶性物质的提取
将急性子用粉碎机粉碎,之后用95 %乙醇回流提取3次,2 h/次,然后进行抽滤,合并提取液,用旋转蒸发仪减压回收溶剂,至无醇味。加适量水混匀,分别用石油醚、醋酸乙醋、正丁醇萃取。挥散溶剂,即得到提取物质。
急性子中水溶性物质的提取
将急性子用粉碎机粉碎,用石油醚脱脂。脱脂处理后的粉末放入圆底烧瓶中,加入80 %乙醇回流去掉小分子物质,将乙醇挥散。样品按照1
∶100的比例加蒸馏水,在80℃水浴煮3次,2 h/次,抽滤,弃残渣,合并滤液,70 ℃浓缩为原体积的1/3,加入3倍体积95 %的乙醇, 抽滤,沉淀用乙醇、***抽洗,冷冻干燥得粗多糖。
急性子抗氧化活性的体外研究
急性子抗卵黄脂质过氧化活性的测定〔3〕
采用依赖鸡卵黄脂蛋白的脂质过氧化模型,操作步骤: mol/L pH ∶1配成悬液,再稀释成1∶25(卵黄∶总体积),磁力搅拌30 min。 ml; ml(对照管加入PBS),再加入25 mmol/ ml; ml,置于37水浴振荡50 min,取出后加入20 %三*** ml,静置10 000 r/min离心15 min, % ml 塞紧管口100 ℃水浴15 min,空白管以PBS取代上清