dna分子的提取和鉴定.ppt

文档介绍：该【dna分子的提取和鉴定 】是由【胜利的喜悦】上传分享，文档一共【54】页，该文档可以免费在线阅读，需要了解更多关于【dna分子的提取和鉴定 】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。DNA的粗提取与鉴定
目的要求
1、了解从细胞中提取DNA的基本原理
2、初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法
3、观察提取出来的DNA
实验思路
1、DNA从哪提取?
2、怎样将DNA与细胞中的其他物质分离?
3、怎样鉴定我们提取的DNA?
实验原理
,是随着NaCl的浓度的变化而改变的。,DNA的溶解度最低。利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。
,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
,但是对DNA没有影响
-80°C的高温,而DNA在80°C以上才会变性
,但对DNA没有影响。
***(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯***可以作为鉴定DNA的试剂。
实验用具:铁架台;铁环;镊子;三角架;酒精灯;石棉网;载玻片;玻璃棒;滤纸;滴管;量筒(100ml,一个);烧杯;(100ml,一个,50ml、500ml各二个);试管(20ml,二个);漏斗;试管夹;纱布。
二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计
(一)实验材料的选取
材料:新鲜的鸡血
注意:
本实验中,要往鸡血中加入抗凝剂(柠檬酸钠溶液)
原则上只要含DNA的生物材料都可以,但是选取DNA含量相对较高的生物组织,成功率更大。
?
(1)先将新鲜的鸡血离心,获得鸡血细胞
(2)在鸡血细胞中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可
(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液
1、破碎细胞
讨论:为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂?
利用了什么原理?
2、过滤,获取含DNA的滤液
(三)去除滤液中的杂质
为了纯化提取的DNA需要将滤液作进一步处理
讨论:此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分?
答:可能含有核蛋白和RNA等杂质
讨论:为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质
答:用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此,通过反复溶解与析出DNA,就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质