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光合细菌液微生态制剂制备方法
本发明公开了一种光合细菌液微生态制剂制备方法,包括平板培养基培养,试管培养,三角瓶培养,二级种子的制备,成品的制备等步骤。本发明中培养基pH值不随着培养时间的延长而升高,-,不会抑制光合细菌的生长;采用低浓度的有机培养基诸如蛋白胨、酵母膏及氮磷钾盐保证了培养出的光合细菌颜色纯正,亮丽,不会变淡、变绿、变黑等;采用低浓度的氮源和碳源保证了低成本,更能适于工业化大规模生产;本发明培养的光合细菌生长速度快,菌液浓度高;工艺简单并易于控制,不易染杂菌,菌株浓度高,加工成本低,生产环境友好。
【专利说明】光合细菌液微生态制剂制备方法
[0001]
【技术领域】
[0002]本发明属于生物【技术领域】,具体涉及光合细菌液微生态制剂制备方法。
[0003]【背景技术】
[0004]光合细菌(Photosynthetibacteria,PSB)是利用光能和二氧化碳维持自养生活的有色细菌。是地球上出现最早、自然界中普遍存在、具有原始光能合成体系的原核生物,厌氧条件下进行不放氧光合作用,没有形成芽孢能力,革兰氏阴性菌,是一类以光作为能源、能在厌氧光照或好氧黑暗条件下利用自然
界中的有机物、硫化物、氨等作为供氢体兼碳源进行光合作用的微生物。
[0005]光合细菌液态微生态的制剂方法通常为采用敞开粗放式的培养方式,这种培养方式会受到自然界中天气温度光照等的干扰,且易掺加进其他的细菌,在有些特殊条件下会影响到光合细菌的主导地位,从而影响光合细菌产品的质量稳定性。
[0006]
【发明内容】
[0007]为了克服现有【技术领域】存在的上述缺陷,本发明的目的在于,提供一种光合细菌液微生态制剂制备方法,解决现有技术采用敞开粗放式方法培养光合细菌液态微生态制剂,易受天气温度光照的干扰,易掺杂其他细菌等,影响光合细菌产品的质量稳定性的问题。
[0008]本发明提供的光合细菌液微生态制剂制备方法,包括以下步骤:
(1)平板培养基培养,光合细菌保存菌种划线接种至平板培养基,121°c灭菌30分钟,32°C培养24h;
(2)试管接种,取发育健壮、菌落典型的菌株接种10ml,12rC灭菌,32°C培养24h;
(3)三角瓶接种100ml,121°C灭菌,32°C培养24h;
(4)三角瓶接种1000ml,121°C灭菌,32°C培养24h;
(5)二级种子的制备,将光合细菌于30°C,,得二级菌种9L,检测菌种的性状、pH值及活菌量;
(6)成品的制备,先向500L的液体发酵灌内加入100L饮用水,将称量好的蛋白胨90g,酵母膏90g,乙酸钠180g,碳酸氢钠180g,***化铵180g,***化镁180g,磷酸氢二钾180g,,搅拌10分钟至全部溶解,然后停止搅拌,加饮用水至180L,定完液位后,开启搅拌,然后打开蒸汽阀升温至100°C,排冷空气,排掉冷空气后继续升温至121°C保持30分钟,灭菌结束,冷却,备用,当培养基冷却至30°C,将光合细菌二级种子9L通过压差接种的方式,接种到500L发酵罐中,30°C,,得三级菌种。
[0009]所述步骤(1)或(2)或(3)或(4),,,,***化铵,***化镁,,15g琼脂,1000ml蒸馏水配置而成。
[0010]本发明提供的光合细菌液微生态制剂制备方法,其有益效果在于,本发明中培养基pH值不随着培养时间的延长而升高,-,不会抑制光合细菌的生长;采用低浓度的有机培养基诸如蛋白胨、酵母膏及氮磷钾盐保证了培养出的光合细菌颜色纯正,亮丽,不会变淡、变绿、变黑等;采用低浓度的氮源和碳源保证了低成本,更能适于工业化大规模生产;本发明培养的光合细菌生长速度快,菌液浓度高;工艺简单并易于控制,不易染杂菌,菌株浓度高,加工成本低,生产环境友好。
[0011]
【具体实施方式】
[0012]下面结合一个实施例,对本发明提供的光合细菌液微生态制剂制备方法进行详细的说明。
[0013]实施例
[0014]本实施例的光合细菌液微生态制剂制备方法,包括以下方法:
(1)平板培养基培养,光合细菌保存菌种划线接种至平板培养基,121°c灭菌30分钟,32°C培养24h;
(2)试管接种,取发育健壮、菌落典型的菌株接种10ml,12rC灭菌,32°C培养24h;
(3)三角瓶接种100ml,121°C灭菌,32°C培养24h;
(4)三角瓶接种1000ml,121°C灭菌,32°C培养24h;
(5)二级种子的制备,将光合细菌于30°C,,得二级菌种9L,检测菌种的性状、pH值及活菌量;
(6)成品的制备,先向500L的液体发酵灌内加入100L饮用水,将称量好的蛋白胨
90g,酵母膏90g,乙酸钠180g,碳酸氢钠180g,***化铵180g,***化镁180g,磷酸氢二钾180g,,搅拌10分钟至全部溶解,然后停止搅拌,加饮用水至180L,定完液位后,开启搅拌,然后打开蒸汽阀升温至100°C,排冷空气,排掉冷空气后继续升温至121°C保持30分钟,灭菌结束,冷却,备用,当培养基冷却至30°C,将光合细菌二级种子9L通过压差接种的方式,接种到500L发酵罐中,300C,,得三级菌种约200L,。
【权利要求】
,其特征在于:包括以下步骤:一、平板培养基培养,光合细菌保存菌种划线接种至平板培养基,121°c灭菌30分钟,,32°C培养24h;二、试管接种,取发育健壮、菌落典型的菌株接种10ml,12rC灭菌,32°C培养24h;三、三角瓶接种100ml,121°C灭菌,32°C培养24h;四、三角瓶接种1000ml,121°C灭菌,32°C培养24h;五、二级种子的制备,将光合细菌于30°C,,得二级菌种9L,检测菌种的性状、pH值及活菌量;六、成品的制备,先向500L的液体发酵灌内加入100L饮用水,将称量好的蛋白胨90g,酵母膏90g,乙酸钠180g,碳酸氢钠
180g,***化铵180g,***化镁180g,磷酸氢二钾180g,,搅拌10分钟至全部溶解,然后停止搅拌,加饮用水至180L,定完液位后,开启搅拌,然后打开蒸汽阀升温至100°C,排冷空气,排掉冷空气后继续升温至121°C保持30分钟,灭菌结束,冷却,备用,当培养基冷却至30°C,将光合细菌二级种子9L通过压差接种的方式,接种到500L发酵罐中,30°C,,得三级菌种。
,其特征在于:,,,,,***化铵,***化镁,,15g琼脂,1000ml蒸馏水配置而成。