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专利名称:便于乳腺腺泡体模型体外构建的试剂盒的制作方法
技术领域:
本实用新型涉及一种试验中使用的试剂盒。
背景技术:
体外构建的乳腺腺泡模型是一种新型的研究乳腺发育与功能的研究载体。以往在体外研究乳腺的泌乳功能时均以乳腺上皮细胞作为研究载体。但是乳腺上皮细胞一旦从乳腺组织中分离出来,进行常规的细胞培养,随着传代次数的增加,其组织特异性功能逐渐消失,大大降低了细胞实验模拟体内环境的真实性。而在基质上培养构建的乳腺腺泡模型是最小的泌乳功能单位,其三维极性结构使腺泡具有完整的乳汁合成和分泌能力,保证了其与体内腺泡在结构和功能上的一致性。这种三维腺泡结构能真实地模拟体内情况,因此可以取代二维条件下培养的单层乳腺上皮细胞,作为泌乳生物学与乳腺功能调控的新型研究载体。以此乳腺腺泡模型为载体开展研究,大大增加了乳腺生物学研究实验结果的直观性、准确性和科学性。但在现阶段进行乳腺腺泡体模型外构建时,需要进行试剂的配制和准备,对于实验人员来说配制和准备试剂增加了实验过程中的复杂性。并且因为制作实验试剂的过程中熟练程度和认知水平的不同,可能配制出的试剂也并不相同,从而最终得到的结果
稳定性和可靠性也不同。
实用新型内容本实用新型为了解决在进行乳腺腺泡模型体外构建的过程中配制和准备试剂所带来的实验过程复杂化的问题,以及所制备出的试剂本身给实验结果带来的稳定性和可靠性不高的缺点,而提出了一种便于乳腺腺泡模型体外构建的试剂盒。便于乳腺腺泡模型体外构建的试剂盒由外包装盒6和五个试剂瓶组成,所述的五个试剂瓶分别为Growthfactor-reducedMatrigel试剂瓶1、腺泡生长培养液试剂瓶2、胰酶-EDTA溶液试剂瓶3、EGTA溶液试剂瓶4和Cellrecoverysolution试剂瓶5,外包装盒6内部设置有两个保温区,所述的两个保温区是有垂直于盒体底面的平板进行分割形成的,Growthfactor-reducedMatrigel试剂瓶1和胰酶-EDTA溶液试剂瓶3位于一个保温区中,腺泡生长培养液试剂瓶2、EGTA溶液试剂瓶4和Cellrecoverysolution试剂瓶5位于另一个保温区中。本实用新型较传统方法有效率高、结果稳定可靠等优势。体外构建乳腺腺泡模型操作简便和价格低廉,可充分满足泌乳生物学与乳腺功能调控研究需求的试剂盒。
图1是本实用新型的结构示意图。
具体实施方式
具体实施方式
一结合图1说明本实施方式,本实施方式由外包装盒6和五
3个试剂瓶组成,所述的五个试剂瓶分别为Growthfactor-reducedMatrigel试剂瓶1、腺泡生长培养液试剂瓶2、胰酶-EDTA溶液试剂瓶3、EGTA溶液试剂瓶4和Cellrecoverysolution试剂瓶5,外包装盒6内部设置有两个保温区,所述的两个保温区是有垂直于盒体底面的平板进行分割形成的,Growthfactor-reducedMatrigel试剂瓶1和胰酶-EDTA溶液试剂瓶3位于一个保温区中,腺泡生长培养液试剂瓶2、EGTA溶液试剂瓶4和Cellrecoverysolution试剂瓶5位于另一个保温区中。
具体实施方式
二本实施方式与具体实施方式
一不同点在于每一个温区是由六块保温板组成的立方体区域。其它组成和连接方式与具体实施方式
一相同。保温板能够将具有-20°C的Growthfactor-reducedMatrigel试剂瓶1和胰酶-EDTA溶液试剂瓶3保持在_20°C,具有4°C的腺泡生长培养液试剂瓶2、EGTA溶液试剂瓶4和Cellrecoverysolution试剂瓶5保持在4°C。
具体实施方式
三本实施方式与具体实施方式
二不同点在于保温板为硬质泡沫塑料板,其它组成和连接方式与具体实施方式
二相同。-reducedMatrigelTM在4°C条件下融解,均勻铺在4°C预冷的细胞培养板上,注意避免产生气泡,;将铺好基质的细胞培养板置于37°C细胞培养箱中,使液态基质成为基质凝胶。-EDTA溶液消化原代培养的乳腺上皮细胞,离心收集细胞。,用1000μ1的加样枪轻轻将细胞团吹散,获得均勻的细胞悬液。用细胞计数板对细胞悬液进行细胞计数,然后用腺泡生长培养液将细胞稀释。,相差显微镜观察。;每4日更换一次分析培养基;培养15日可获得具有泌乳能力的乳腺腺泡。,弃去培养皿中的腺泡生长培养液。在培养皿中加入Imlcellrecoverysolution,4°C处理75min,溶解基质成分。离心弃上清,沉淀即为乳腺腺泡。,在沉淀收集的乳腺腺泡中加入EGTA溶液,室温孵育lOmin。离心弃沉淀,上清即为乳腺腺泡腔内容物。本实用新型内容不仅限于上述各实施方式的内容,其中一个或几个具体实施方式的组合同样也可以实现发明的目的。
权利要求便于乳腺腺泡模型体外构建的试剂盒,其特征在于它由外包装盒
(6)和五个试剂瓶组成,所述的五个试剂瓶分别为GrowthfactorreducedMatrigelTM试剂瓶(1)、腺泡生长培养液试剂瓶(2)、胰酶EDTA溶液试剂瓶(3)、EGTA溶液试剂瓶(4)和Cellrecoverysolution试剂瓶(5),外包装盒(6)内部设置有两个保温区,所述的两个保温区是有垂直于盒体底面的平板进行分割形成的,GrowthfactorreducedMatrigelTM试剂瓶(1)和胰酶EDTA溶液试剂瓶(3)位于一个保温区中,腺泡生长培养液试剂瓶(2)、EGTA溶液试剂瓶(4)和Cellrecoverysolution试剂瓶(5)位于另一个保温区中。
,其特征在于每一个温区是由六块保温板组成的立方体区域。
,其特征在于保温板为硬质泡沫塑料板。
专利摘要便于乳腺腺泡体模型体外构建的试剂盒,它涉及试验中使用的试剂盒。它解决了在进行乳腺腺泡模型构建试验的过程中配制和准备试剂所带来的实验过程复杂化的问题,以及所制备出的试剂本身给实验结果带来的稳定性和可靠性不高的缺点。它外包装盒和五个试剂瓶组成,所述的五个试剂瓶分别为Growthfactor-reducedMatrigelTM试剂瓶、腺泡生长培养液试剂瓶、胰酶-EDTA溶液试剂瓶、EGTA溶液试剂瓶和
Cellrecoverysolution试剂瓶,外包装盒内部设置有两个保温区,两个保温区是有垂直于盒体底面的平板进行分割形成的,Growthfactor-reducedMatrigelTM试剂瓶和胰酶-EDTA溶液试剂瓶位于一个保温区中,其他试剂瓶位于另一个保温区中。体外构建乳腺腺泡模型操作简便,可充分满足泌乳生物学与乳腺功能调控研究需求的试剂盒。