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专利名称:丹参***ⅱa在制备治疗银屑病药物中的应用的制作方法
技术领域:
本发明涉及丹參***IIA的新用途,具体涉及丹參***IIA在制备治疗银屑病药物中的应用。
背景技术:
银屑病是ー种由多基因遗传決定的、多环境因素刺激诱导的免疫异常性慢性增生性皮肤病。银屑病的主要病理改变为角质形成细胞异常增生、角化不全、新生血管形成和炎性细胞浸润,其临床特征是在红斑上反复出现多层银白色干燥鳞屑,剥去鳞屑有明显的出血;1^U(,,[J].NEnglJMed,2009,361:496-509)。银屑病的病因与发病机制非常复杂,目前尚无完全根治的手段,该病属高发病种,在英美国家其发病率为2%,%。全球范围内该病患者已愈两千万,且发病率呈持续升高的趋势。([J].BrJPharmacol,2010,160:810-20;BaileyEE,FerenceEH,AlikhanA,:ASystematicReviewandMeta-analysis[J].ArchDermatol,2012,148(4):511-522)
由于银屑病反复发作,常需反复治疗,因而给患者及其家庭带来沉重的经济负担,对患者的身体健康和精神影响甚大。中医古籍很早就有关于银屑病的记载,称之为“白庀”、“松皮癬”。目前,治疗银屑病的药物,如维A酸、甲氨蝶呤、环孢素、依那西普或地塞米松等糖皮质激素,但这些药物存在不少缺点如毒副作用大,许多患者不能耐受;只能快速控制进行期患者的症状,不能有效延长患者的缓解期;生物制剂如依那西普等价格十分昂贵。中医中药治疗银屑病疗效独特,因此积极开展研究,进ー步筛选中草药中抗银屑病的有效成分,进而开发出新型银屑病的药物具有十分重要的意义。參***IIA是ー种从中药丹參中提取的有效成分,IUPAC命名Phenanthro[1,2_b]furan-10,11-dione,6,7,8,9-tetrahydro-l,6,6-trimethyl,英文名称TanshinoneIIA,别名丹參醌II,丹參醌IIA,分子式C19H1803,;CAS号568_72_9,物理性质桔红色针状结晶(EtOAc),熔点209210°C。易溶于こ醇、***、こ醚、苯等有机溶剤,微溶于
水。其结构简式如下H3CCH3
!
0Y^h3目前文献报导,所述丹參***IIA具有抗肿瘤、抗肝纤维化、抗动脉粥样硬化、抗心律失常等多种药理作用,但国内外尚未见将丹參***
IIA用于治疗银屑病的相关报道。
发明内容
本发明的目的是公开丹參***IIA在制备治疗银屑病药物中的应用,以克服现有技术中的不足。试验证明,所述的丹參***IIA,具有明显的抑制HaCaT细胞增值的作用,能够用于制备治疗银屑病药物,所述的丹參***IIA,可采用文献(***IIA的提取方法研究,化学工程师,2004,8:64-65)报导的方法制备,或者采用商业化的产品,如东科麦迪森医药科技有限公司、宝鸡市国康生物科技有限公司的产品;本发明还涉及ー种用于治疗银屑病的药物组合物,包括治疗有效量的丹參***IIA和医药学上可接受的载体,所述的载体是指药学领域常规的载体,例如稀释剂、赋形剂如水等;粘合剂如纤维素衍生物、明胶、聚こ烯吡咯烷***等;填充剂如淀粉等;崩裂剂如碳酸钙、碳酸氢钠;另外,还可以在组合物中加入其他辅助剂如防腐剤、抗菌剂等;本发明的组合物可以制备成胶囊剂、片剂等常用ロ服固体制剂和乳膏、霜剂、凝胶剂等外用制剂;所述用于治疗银屑病的药物组合物中,丹參***IIA的重量含量为I99%;本发明的药物组合物,可以通过外用和ロ服的途径施加于需要治疗的患者,ロ服剂量一般为1030mg/公斤体重/天,外用剂量则是皮损部位100300mg/cm2/天,具体可根据患者的年龄、病情,由医师决定。综上所述,目前银屑病缺乏有效的治疗手段,本发明的有益效果在于根据银屑病的病因和病理机制,大量筛选了一千多种中草药化合物,终于筛选出能够有效治疗
银屑病的丹參***IIA0本发明的丹參***IIA经细胞实验、动物实验和临床试验证实效果显著,安全性好,是ー种新型的银屑病治疗药物,具有较强的发展前景。
具体实施例方式以下通过实施例进ー步说明本发明,但不用来限制本发明。实施例I制备ロ服治疗银屑病的丹參***IIA胶囊(1000粒),组分的重量如下原料重量(g)供应商
丹参***IIA100东科麦迪森医药科技
乳糖80广州利源化工
硬脂酸镁5郑州远大化工
生产エ艺将丹參***IIA、乳糖混合均匀,用水润湿,然后过20目筛,干燥,再次过22目筛,然后加入硬脂酸镁,混合均匀,装入胶囊。实施例2制备外用治疗银屑病的丹參***IIA乳膏,组分的重量百分比如下
原料比例(%)供应商
A相
十六十八醇15晨茜化工

硬脂酸5晨茜化工
白凡士林4晨茜化工
26号白油30
单硬脂酸甘油酯3晨茜化工
液体石蜡I晨茜化工B相
甘油晨茜化工
丹参***IIA5东科麦迪森医药科技



,90°C条件下混合;,90V条件下混合;,边加边搅拌,时间约20分钟;,降至室温即得乳膏。实施例3丹參***IIA抑制人角质形成细胞(HaCaT细胞)
***IIA标准品购自中国药品生物制品检定所;阳性对照药物地蒽酚购自武汉同兴生物科技公司;3-(4,5_ニ***噻唑-2)-2,5-ニ苯基四氮唑溴盐(MTT)购自北京鼎国生物技术有限公司;H0echeSt33258荧光染料购自美国sigma公司;AnnexinV细胞凋亡检测试剂盒购自联科生物技术有限公司。-61荧光显微镜;美国贝克曼库尔特有限公司FC-500流式细胞仪;美国BIOTEK公司Epoch酶标仪。,消化液消化,,接种在96
孔培养板内,姆孔100μI,24h后见细胞完全贴壁,分别换入含丹參***IIA或地蒽酚的MEM液,每孔100μ1,,,,,,,、,对照组加入MEM液,每组浓度均设6个复孔。培养48小时后,每孔加入MTT10μl(5mg/ml),继续孵育4小吋,此时镜检可观察到、活细胞内形成的颗粒状蓝紫色結晶。小心吸去上清,加DMSO150μ1/孔终止反应。在微型振荡器上摇匀15min,溶解形成的结晶,立即比色,在主波长570nm,參比波长655nm处用酶标仪检测吸光度A值。比色以空白孔调零,细胞増殖率=(A实验组-A对照组)/A对照组X100%,増殖抑制率=(I-増殖率)X100%,每组实验重复3次。根据增殖抑制率计算IC5(I。-FITC,PI双染,流式细胞仪器检测细胞早期凋亡选择对数生长期HaCaT细胞,消化液消化,MEM完全培养液调制成5X105/ml细胞悬液,接种在60mm培养板内,姆孔5ml,24h后见细胞完全贴壁,分别换入含隐丹參***、丹參***I和丹參***IIa的MEM液,、,、,对照组加入MEM液,培养48h后,弃去培养基,PBS洗一遍,%胰酶(无EDTA)消化细胞呈单细胞悬液,离心收集细胞,PBS洗一遍,,分别加入FITC突光标记的AnnexinV(100μg/ml)5μI和PI(10μg/ml)10μ1,室温下避光孵育5min,流式细胞仪检测细胞早期凋亡率。
***IIA对HaCaT细胞增值抑制作用MTT实验结果显示,,IC50采用直线回归方程分析,,与地蒽酚(IC50=L31mg/mL)在同一数量级。***IIA作用于HaCaT细胞48小时后,G2/M期细胞百分比与对照组相比明显增加,G1期百分比減少,细胞阻滞于G2/M期,且随着浓度增加,G2/M期比例不断上升,G1期比例不断減少(表I)。表I不同浓度丹參***IIA作用48小时对HaCaT细胞周期的影响(%)
权利要求
***IIA在制备治疗银屑病药物中的应用。
,其特征在于,包括治疗有效量的丹參***IIA和医药学上可接受的载体。
,其特征在于,为胶囊剂、片剂等常用ロ服固体制剂或乳膏、霜剂、凝胶剂等外用制剂。
,其特征在于,丹參***IIA的重量含量为I99%。
,其特征在于,通过外用和ロ服的途径施加于需要治疗的患者。
全文摘要
本发明公开了丹参***ⅡA在制备治疗银屑病药物中的应用。试验证明,所述的丹参***ⅡA,具有明显的抑制HaCaT细胞增值的作用,能够用于制备治疗银屑病药物。本发明的有益效果在于,动物实验和临床试验证实效果显著,安全性好,是一种新型的银屑病治疗药物,具有较强的发展前景。

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