文档介绍：干旱胁迫对小麦幼苗生理指标的影响
干旱胁迫对小麦幼苗几个主要生理生化指标的影响
摘要:以室内自己种植的小麦幼苗为试材,,结果表明:随着PEG浓度的增大,下麦叶片的相对电导率、超氧化物歧化酶、丙二醛含量增加,质膜遭到损害,大量离子外渗,脯氨酸含量增加。
关键字:干旱胁迫电导率丙二醛脯氨酸谷胱甘肽
引言
干旱是限制作物产量的非生物因素中造成损失最大的因素,我国大部分地区水资源极其匮乏,农业用水很贫乏,尤其在西北干旱区,植物常常会遭遇干旱胁迫时,在干旱胁迫下植物细胞内会积累大量活性氧,细胞膜发生膜脂过氧化,膜透性增大。干旱胁迫后,SOD、POD和CAT等组成的保护酶系在清除活性氧、保持细胞膜稳定性方面起着重要的作用。植物体内游离脯氨酸和可溶性蛋白可作为胞质渗压剂也对低温胁迫下的植物细胞起保护作用。本试验进一步证实了前人研究的结果,同时发现干旱胁迫对细胞膜透性的影响较少。
1试验材料与方法
学生宿舍自己种植的小麦,实验测定开始半月前播种,(PBS)、甲硫氨酸溶液、EDTA-Na2溶液、核黄素溶液、氮蓝四唑溶
液、反应混
合液、磷酸缓冲液、酸性茚三酮溶液,3%磺基水杨酸、冰醋酸、甲苯、磷酸、10%TCA、%TBA等。
选择10%PEG6000,20%PEG6000对小麦幼苗进行处理。本次试验设计了三个处理,分别是用10%PEG6000,20%PEG6000和清水三个处理,其中每个处理
小麦浇灌20ml。每个处理3次重复。清水和不同浓度的PEG溶液在试验指标测定前一天浇灌,即处理时间为24小时。
表1 实验的不同处理试验编号 CK T1 T2 试验处理
浇灌清水 10%PEG6000 20%PEG6000
实验小麦经过干旱胁迫处理后,植物细胞组织的膜透性发生变化,通过超氧化物歧化酶(SOD)的活力测定,脯氨酸(Pro)含量测定,以及丙二醛(MDA)含量的测定,间接的判断植物在干旱胁迫下生理生化的变化。
(1)细胞的透性通过电导率仪来测量,
(2)超氧化物歧化酶的测定:分别取3ml反应混合液和30ul酶液于试管中,将试管置于光照培养箱中在4000lux光照下反应20min;同时做两支对照管,其中1支试管取3ml反应混合液加入30ulPBS(不加酶液)照光后测定作为最大光还原管,另一支只加缓冲液置于暗中测定时用于调零。以不照光的对照管(只有缓冲液并置于暗处)调零后,避光测
560nm波长下的吸光度(出现颜色即可测定) SOD活性单位以抑制NTB光化还原50%所需酶量(测的样品值要在最大管的一半左右才合适,否则要调整酶量)为1个酶活单位(u)。SOD总活性=[(Ack-AE)×V]/(1/2Ack×W×Vt),Ack为照光对照管的吸光值;AE为样品管的吸光值;V为样品
液总体积(ml,,加入PBS的体积);Vt为测定时的酶液用量(ml,30ul);W
为样品鲜重(g,测定时应换算为叶绿体的质量mg)。
(3)脯氨酸酶活性的测定:首先标准曲线的制作,之后进行脯氨酸的提取:准确称取不同处理的待测植物叶片