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一原理
DNS即二硝基水杨酸法是利用碱性条件下,二硝基水杨酸(DNS)与还原糖发生氧化还原反
应,生成3-氨基-5-硝基水杨酸,该产物在煮沸条件下显棕红色,540nm处有吸收,且在一
定浓度范围内颜色深浅与还原糖含量成比例关系的原理,用比色法测定还原糖含量的。
二试剂及方法

,5-二硝基水杨酸
,5—二硝基水杨酸,逐步加入21g氢氧化钠,再加入
182g四水合酒石酸钾钠、、,温水浴(不超过48℃),不断搅
拌,直至溶液清澈透明。用蒸馏水定容至1000mL,保存在棕色瓶中,与二氧化碳隔绝,
静置5~7天后使用,贮存期为6个月。

表1葡萄糖标曲的绘制方法
试管
试剂
012345
葡萄糖标准液(ml)
蒸馏水(ml)
3,5-二硝基水杨酸(ml)
糖含量(mg)
混合均匀,沸水浴5min,冷却后加入4mL蒸馏水,混匀,在540nm下测OD值

将发酵液稀释一定倍数后,取3只比色管标号1,2,3,,加入DNS
试剂混匀,沸水浴,冷却后加入蒸馏水混匀,测

表2样品的测定方法
管号012
还原糖待测样品(mL)
蒸馏水(mL)
DNS试剂(mL)
蒸馏水(mL)444
A540nm
计算所得还原糖含量(mg)
三结果计算

计算得到的还原糖量(mg)
还原糖含量(g/L)稀释倍数
加人样品的体积()