文档介绍：该【氧化亚铁硫杆菌的制备方法】是由【开心果】上传分享，文档一共【6】页，该文档可以免费在线阅读，需要了解更多关于【氧化亚铁硫杆菌的制备方法】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。氧化亚铁硫杆菌的制备方法
专利名称:氧化亚铁硫杆菌的制备方法
技术领域:
本发明涉及一种天然橡胶再生剂的制备方法。
背景技术:
1947年,Colmer和Hinkle从矿山酸性废水中首次分离出氧化亚铁硫杆菌(Thiobacillusferrooxiidans,)。,,具有圆纯的末端,单生或对生,成短链者较少,严格好氧,利用氨作为氮源,利用***盐缓慢。该菌种广泛存在于土壤、海水、淡水、垃圾、硫磺泉和沉积硫内,尤以金属硫化矿和煤矿等酸性矿坑水(pH〈4)中最为常见。,靠氧化Fe2+为Fe3+及将低价态硫氧化为硫酸盐获得能量进行生命活动,又因其较强的氧化Fe2+和氧化s的能力,广泛应用于烟气脱硫、煤炭脱硫、生物浸矿和生物淋滤等研究中。早在1945年,Thaysen等就认为可利用有氧化能力的微生物对废橡胶进行脱硫;,认为氧化亚铁硫杆菌对废橡胶脱硫再生有一定的效果;(groundtirerubber,GTR),作用10d,%,而作用20d,%;Romine等利用氧化亚铁硫杆菌对GTR进行脱硫,作用10d后,培养基中的硫酸根含量显著提高。利用微生物脱硫对废橡胶进行再生有明显的优势,它不需要高温、高压和催化剂,在常温常压脱硫,脱硫费用低,设备要求简单。但这种再生技术还处在实验室研究阶段,存在微生物脱
硫活性不高,脱硫率低,作用时间长,机理不明确等问题,商业化的道路还很长。目前国内没有这方面的研究。
发明内容
本发明旨在提供一种脱硫再生废橡胶的氧化亚铁硫杆菌的制备方法。本发明所述的氧化亚铁硫杆菌的制备方法,其特征在于包括:
取5g火山沉积物样品溶于50mL无菌水,30°C,170r/min振荡培养6h,然后静置2h;吸取10mL上层水样加入盛有100mL已灭菌的9K培养基中,30°C,170r/min摇床培养,直至培养基由浅绿色变成红棕色,再进行5次富集培养,再用固体培养基涂布平板法分离、纯化菌种。优选地,9K培养基是用如下方法制得的:
A组分:(NH4),,,,Ca(NO3),蒸懼水700mL;
B组分:,蒸馏水300mL,10moI/LH2SO4ImL;
培养基中A组分于121°C,,B组分加入ImL10moI/LH2SO4在105°C下灭菌,将A组分和B组分混合,。更优选地,所述的固体培养基是向
%%酵母浸粉。本发明制得的氧化亚铁硫杆菌对天然橡胶具有一定的脱硫再生效果,经过氧化亚铁硫杆菌作用后,天然橡胶的硫含量降低,硫被氧化生成S-O基团,表明氧化亚铁硫杆菌对天然硫化胶粉的硫交联键有转化或断裂作用。
具体实施例方式实施例一。1、制备9K培养基:
A组分:(NH4),,,,Ca(NO3),蒸懼水700mL;
B组分:,蒸馏水300mL,10moI/LH2SO4ImL;
培养基中A组分于121°C,,B组分加入ImL10moI/LH2SO4在105°C下灭菌,将A组分和B组分混合,,待用。2、制备固体培养基
%%酵母浸粉,待用。3、制备氧化亚铁硫杆菌
取5g火山沉积物样品溶于50mL无菌水,30°C,170r/min振荡培养6h,然后静置2h;吸取10mL上层水样加入盛有100mL已灭菌的9K培养基中,30°C,170r/min摇床培养,直至培养基由浅绿色变成红棕色,再进行5次富集培养,再用固体培养基涂布平板法分离、纯化菌种。平板上的菌落为白色小圆点,略黄,直径约Imm,凸起,边缘整齐,较干。经透射电镜观察,该菌为圆头短杆状,
,能运动,革兰氏染色阴性。经16SrDNA序列分析,16SrDNA的测序结果在NCBI中blast分析,与氧化亚铁硫杆菌菌株afl、DXH,TSK-UH-4的同源性达100%,证实为氧化亚铁硫杆菌。
实施例二。取生长24h菌液(107个/mL)作为种子液,按10%接种量接入100mL脱硫再生培养基后于30°C,170r/min下培养,,5份、2份硫天然胶片(naturalrubber,NR)各一片(),继续培养10d后测定橡胶的基团变化、硫含量变化及橡胶表面形态。其中不论是5份硫还是2份硫,NR胶片在I010-1070cnT1处出现吸收峰。I010-1070cnT1处是S=O的吸收峰,,使橡胶中交联的硫被氧化,产生了亚砜,硫交联键被打断。(EDS)分析表明,s元素的含量显著降低,%。未处理NR表面比较平整,处理后的NR胶片的表面结构由原来的致密状变为疏松状,产生许多空洞。。
权利要求
,其特征在于包括:取5g火山沉积物样品溶于50mL无菌水,30°C,170r/min振荡培养6h,然后静置2h;吸取10mL上层水样加入盛有100mL
已灭菌的9K培养基中,30°C,170r/min摇床培养,直至培养基由浅绿色变成红棕色,再进行5次富集培养,再用固体培养基涂布平板法分离、纯化菌种。
,其特征在于9K培养基是用如下方法制得的:A组分:(NH4),,,,Ca(NO3),蒸懼水700mL;B组分:,蒸馏水300mL,10moI/LH2SO4ImL;培养基中A组分于121°C,,B组分加入ImL10moI/LH2SO4在105°C下灭菌,将A组分和B组分混合,。
,%%酵母浸粉。
全文摘要
本发明涉及一种天然橡胶再生剂的制备方法,本发明所述的氧化亚铁硫杆菌的制备方法,其特征在于包括取5g火山沉积物样品溶于50mL无菌水,30℃,170r/min振荡培养6h,然后静置2h;吸取10mL上层水样加入盛有100mL已灭菌的9K培养基中,30℃,170r/min摇床培养,直至培养基由浅绿色变成红棕色,再进行5次富集培养,再用固体培养基涂布平板法分离、纯化菌种。本发明制得的氧化亚铁硫杆菌对天然橡胶具有一定的脱硫再生效果,经过氧化亚铁硫杆菌作用后,天然橡胶的硫含量降低,硫被氧化生成
S-O基团,表明氧化亚铁硫杆菌对天然硫化胶粉的硫交联键有转化或断裂作用。