文档介绍：该【间接免疫荧光法测课件 】是由【gxngqvk】上传分享，文档一共【38】页，该文档可以免费在线阅读，需要了解更多关于【间接免疫荧光法测课件 】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。抗核抗体
【自身抗体】:指抗自身组织、器官、细胞及其成分的抗体
【ANA】:指抗细胞核成分(DNA,RNA,蛋白质和酶)的抗体。ANA存在一个谱
ANA新概念:抗核酸(Nucleicacid)和核蛋白(Nucleoprotein)抗体的总称
某些核抗原成分在核仁和胞浆内比核质内更丰富
ANA检测的意义
有助于疾病的诊断
如抗Sm是SLE标记抗体;
抗ScL-70是SD的标记抗体;
抗Jo-1是PM/DM的标记抗体;
观察疾病活动度和治疗反应
研究发病机理
【ANA分类】
抗DNA(dsDNA,ssDNA)
抗组蛋白(Histone)
抗非组蛋白(Nonhistone,ExtractableNuclearAntigen,ENA)
抗核仁(Nucleolus)
几种ENA的由来及同义词
Sm:病人名:Smith
RNP:u1RNP或nRNPNuclearRibonucleoprotein
SSA:ROSjogren’ssyndromeA
SSB:La,Ha,Sjogren’ssyndromeB
Jo-1:病人John
ScL-70:Scleroderma
【ANA由来】
中性粒细胞
DNP(DNA-Histone)
+
抗DNP
+
补体
均质体
LE细胞
LE细胞:并非SLE特有,PM、SD、RA、SS等结缔组织病,药物
过敏,慢活肝等亦可阳性。抗DNP取代LE细胞的检测
+
ANA的筛选:间接免疫荧光法
+
+
抗原
抗体(血清)
抗原—抗体
第二抗体
ANA的筛选:间接免疫荧光法
几种ENA的由来及同义词
药物诱导的红斑狼疮 (100%)
过敏,慢活肝等亦可阳性。
LE细胞:并非SLE特有,PM、SD、RA、SS等结缔组织病,药物
检查生物薄片是否与液滴接触良好,然后继续下一张。
在盖玻片上滴加甘油/PBS。
RNP:u1RNP或nRNPNuclearRibonucleoprotein
荧光显微镜下观察荧光。
ANA阳性者进一步检测各亚类ANA抗体对明确诊断、临床分型、病情观察、预后及治疗评价有重要意义。
随后,结合抗体可与标记荧光的二抗进行反应,并可在荧光显微镜下观察。
几种ENA的由来及同义词
注意:为防止破坏基质,不要擦拭反应区的间隙。
按照要求用记号笔对玻片进行标记。
DNP(DNA-Histone)
抗非组蛋白(Nonhistone,ExtractableNuclearAntigen,ENA)
滴度定义:与相同稀释倍数的阴性血清相比,能观察到特异性荧光反应的最高稀释度
只有当载片平衡到室温后方可打开袋子。
ANA阳性者进一步检测各亚类ANA抗体对明确诊断、临床分型、病情观察、预后及治疗评价有重要意义。
Jo-1:病人John
生物薄膜载片上的IgA、IgG、IgM类特异性抗体可以与抗核抗原反应;
实验原理:
生物薄膜载片上的IgA、IgG、IgM类特异性抗体可以与抗核抗原反应;随后,结合抗体可与标记荧光的二抗进行反应,并可在荧光显微镜下观察。
抗原
人特异性抗体
FITC标记的抗人抗体
FITC
FITC
载片
实验原理:
生物薄片马赛克TM技术