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核小体在DNA上的位置有特异性吗?现在已经清楚,组蛋白八聚体在DNA上组装并不是与序列无关的随机结合,有些情况下模式通过内部途径实现,定位取决于DNA的结构特征;有些情况下模式通过外部途径达成,定位取决于其它蛋白质与DNA或/和组蛋白的相互作用。
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历史上曾经提出过DNA复制的3种假设
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In1958,MeselsonandStahlprovidedtheexperimentalproofforthesemiconservativemodelofDNAreplication(著名实验:用同位素标记,密度梯度离心。)
大肠杆菌在含有15NH4Cl为唯一氮源的培养基上生长多代,这时DNA中的嘌呤和嘧啶中的氮几乎全是15N。然后将大肠杆菌转移到含有14NH4Cl的培养基中,在不同的间隔时间,收集细菌并裂解,提取DNA,并用CsCl梯度密度超速离心进行分析()。
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上述实验证明新合成的DNA同时含有15N和14N,因此DNA的复制不可能是全保留复制。
为了证明DNA复制不是分散复制,MeselsonandStahl进行了进一步的实验,他们将15N标记的细菌在14N培养基上保持一代,然后提取DNA,加热到100度,使DNA双链变性为单链,再对变性的单链进行CsCl梯度密度超速离心,发现了两条分开的条带,表明一条链是15N标记的,另一条链是14N标记的,因此DNA复制是半保留复制,而不是分散复制。
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在DNA复制过程中复制区域双螺旋解旋并分开,以每条单链为模板,按碱基互补配对原则,由DNA聚合酶催化合成新的互补链,结果由一条链成为互补的两条链,这样新形成的两个DNA分子与原来的DNA分子的碱基序列完全相同。
由于每个子代DNA的一条链来自亲代DNA,另一条链则是新合成的。这种复制方式称为半保留复制。
DNA复制是半保留复制(semiconservativereplication)
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过程复杂;需要多种酶和蛋白质参与(包括拓扑异构酶、解旋酶、单链DNA结合蛋白、引物合成酶、DNA聚合酶及连接酶等)。
DNA的复制-半保留复制
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DNA半保留复制的生物学意义:
DNAreplicationbysemi-,geneticmessageoforganismkeepsrelativestable.
——carrierofgeneticmessage.
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Theoriginofreplication(复制起始点):asequenceofDNAatwhichreplicationisinitiated(即DNA复制起始发生的位点).
复制从特定位点开始,双螺旋的两条链分开形成两条DNA模板,逐步向未复制部分扩大;刚分开的两条模板链与未复制的双链之间的连接区(即正在复制的分叉部位)称为复制叉(replicationfork)。
Thereplicon(复制子).(即具有一个复制起点,作为一个复制单位的DNA。)
、方向和速度
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