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山东省胸科医院
邱丽华
2014-06-04
诊断技术
细菌学
分子生物学
免疫学
生化
影像
病理
经皮肺穿刺
气管镜
胸腔镜
细菌学检查
涂片和培养
快速培养、药敏检测技术
噬菌体裂解试验
结核杆菌L型检查
涂片和培养
涂片的优点:①简便:技术要求低,不需特殊仪器设备;②快速:当天可得出结果;③价廉:所耗材料价格低廉。
涂片的缺点:①敏感性低,通常需5000—10000条菌/ml才能够得到阳性结果;②特异性差,各种分支杆菌均可着色,需要进一步鉴定是否为结核分支杆菌;③无法区别死菌与活菌。
痰涂片抗酸染色阳性检出率受检验人员的技术水平和收集痰液标本的质量影响很大,特别是咳痰的时间,痰标本的性状等因素。
痰涂片荧光显微镜检查比光学显微镜检具有更高的灵敏度,且所需时间少,值得开展。
培养的灵敏度略高于涂片法,并是鉴定活菌的可靠方法,还可进一步进行菌种鉴定和药敏试验,被誉为诊断结核病的“黄金标准”。
常规罗氏培养基培养时间长,需4—8周才能出结果,而且阳性率也只有30-40%;同时各种分支杆菌均可生长,需结合菌种鉴定才可确定是否为结核分支杆菌。
由于涂片和培养的阳性检出率偏低,致使大量结核病人漏诊或误诊,严重影响了临床诊治的需要。
快速培养、药敏检测技术
BactecTB460
BactecMGIT960
BactecTB460
基本原理是分枝杆菌在含有14C标记棕榈酸的12B培养基中生长、分解利用棕榈酸,产生14C02,仪器检测系统自动测试14C02含量,并将其换算成生长指数(GI值),GI值升高提示有分枝杆菌生长。
在12B培养基中加入一定浓度的抗痨药物,则可进行分枝杆菌的药敏试验。
应用结果表明BactecTB460可缩短培养时间(涂阳病例平均阳性天数9—14天),药敏试验只需5-7天,同时阳性检出率约提高10%,且操作简便、自动化强,还可进行快速菌型鉴定。
存在的主要问题是液体培养基中无法观察菌落形态,且污染率高于罗氏培养,并且仪器与试剂价格较贵、有放射性污染
BactecMGIT960
基本原理是其所使用的培养瓶底部含有包被于树脂上的荧光显示剂,由于该显示剂为氧抑制性,当分支杆菌生长使氧消耗后,荧光显示剂被激活,而发出荧光。检测系统每隔60分钟连续测定培养管内荧光强度,从而判断管内分枝杆菌生长情况。该培养仪可用于痰、支气管灌洗液、胸水、腹水、脑脊液、尿液、脓液、关节液、病灶组织或干酪块各种临床标本的分枝杆菌培养、初步菌种鉴定和药物敏感试验
MGIT960
自动化程度更高、操作更为简便,缺点是价格更高。
噬菌体裂解试验
分支杆菌噬菌体是一种DNA病毒,因其对分支杆菌有特异性而得名
噬菌体D29对缓慢生长的结核分支杆菌及快生长的耻垢分支杆菌有亲噬性,因此已被用于结核分支杆菌的快速检测及药敏试验