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专利名称:用于动物颈内注射的针头的制作方法
技术领域:
本实用新型涉及一种用于动物颈内注射的针头。
背景技术:
脑中风是严重危害人类健康和生命安全的常见的难治性疾病,目前已成为世界范围内的顽症之一。而且脑中风存在着发病率高、致残率高、死亡率高的“三高”现象。据统计,我国每年发生脑中风病人达200万,发病率高达120/10万,致残率更是高达了75%。我国每年中风病人死亡120万。大鼠的脑中风模型是研究该疾病最常用的动物模型。检测候选药物(化学药物,具有治疗功能的细胞、核酸、蛋白等)的疗效时,对模型动物进行静脉和口服给药到达脑部的剂量只有1/6-1/5(因脑部的血占心脏总排出量的1/6-1/5),加上大脑屏障的存在,许多药物不能穿透大脑屏障,使其临床效果甚微。而采用颈总动脉(CCA)注射可以直接把全部药物注入大脑的病变部位,使药物直接发挥其疗效。颈内动脉(ICA)是颈总动脉在甲状腺的后端向外侧发出的一个小分支,从颈深部穿行达颅底,在鼓室后分出一大分支一翼腭动脉(PPA),这也是颈内动脉的唯一颅外分支。颈内动脉从颈总动脉发出后走行5mm后便发出翼腭动脉。颈内动脉主干分与翼腭动脉和颈内动脉形成“Y”形结构。翼腭动脉行向外侧,相当于人类上颌动脉,分支分布于眼眶、鼻腔和部分口腔结构以及硬脑膜。颈内动脉相对行于内侧,沿鼓室内侧延伸一小段距离后进入颅腔,发出颅内分支。目前常用的颈内注射方法有两种
:一种是导管注射法,另外一种是用注射针直接注射法。前者注射前需要先置导管于颈内动脉内,后者多采用价格昂贵的Hamilton针(针孔位于针尖部位)进行直接注射。导管的方法容易在留在颈内动脉内的导管周围形成微血栓,直接进针法不但在进针和出针是容易造成大出血,而且操作时要求非常高,否则容易戳破动脉管壁。更为不便的是,上述两种方法皆需要结扎翼腭动脉。翼腭动脉位置很深,实验中常需要剪开二腹肌后腹才能暴露,结扎该动脉具有比较大的难度,容易导致血管断裂出血,对大鼠造成较大的损伤。此外,翼腭动脉起始部的舌咽神经丛的分离亦是精细的操作。而且翼腭动脉在永久性闭塞情况下,颈内动脉内的栓线周围容易形成血栓对再灌注成功率有影响。
实用新型内容本实用新型的目的是提供一种用于动物颈内注射的针头。本实用新型提供了一种注射针头,它包括注射器针头的本体1,其特征在于:所述针头的针尖2呈钝圆形且没有开口,所述针头的出液孔3位于针头本体的侧壁上。由于针尖采用了钝圆形,不容易在颈内注射时戳破动脉管壁并造成大出血。根据动物的种类,可以选择具体的针头型号(管径的大小和侧口到针尖的距离
-rf*)O[0009]所述注射针头特别适用于对大鼠进行颈内注射,尤其适用于对大鼠脑中风模型进行颈内注射,从而用于筛选治疗脑中风的药物。所述出液孔距离所述针尖的距离可为5mm。-。-。采用所述针头对大鼠进行注射时,注射速度可为24G-32G。本实用新型还保护一种注射针,由注射器和所述注射针头组成;所述注射针头安装于所述注射器的出液口。采用本实用新型提供的注射针对大鼠进行颈内注射时可以从颈总动脉进针也可以从颈外动脉进针,针头前端抵大鼠眶下裂周围骨面,从而使侧面流出的液体进入颈内动脉入颅分支支配的区域。采用本实用新型提供的针头进行大鼠颈内注射,可以使药物(化学药物,具有治疗功能的细胞、核酸、蛋白等)专向进入大鼠颈内动脉的颅内分支,与现有的大鼠颈内注射方法相比,操作简单、易于掌握、更重要的是不需要结扎翼腭动脉,避免了分离该血管对周围神经的影响以及再灌注的影响。采用本实用新型提供的针头进行大鼠颈内注射,大鼠的成活率高,术后并发症少,对于科研模型的注射非常实用,可以满足科学研究和有关领域发展的需要。应用此颈内注射针可治疗脑类相关疾病。
图1为本实用新型提供的针头的结构示意图。图2为大鼠颈内注射针的进针模式图;A:从颈外动脉进针;B:从颈总动脉进针。图3为模型大鼠颈内注射纯蓝墨水示踪的照片'K'翼腭动脉注射纯蓝墨水;
B:采用本实用新型的注射针在未结扎翼腭动脉的情况下,向颈内动脉注射纯蓝墨水。图4为模型大鼠颈内注射MSCs后的细胞追踪。A-B为体外MSCs细胞的diI染色;C-E为利用颈内注射针颈内注射后MSCs的体内示踪。
具体实施方式
以下结合附图对本实用新型做进一步说明,但本实用新型并不局限于以下实施例。本实用新型提供了一种注射针头,它包括注射器针头的本体1,所述针头的针尖2呈钝圆形(光滑不尖锐)且没有开口,所述针头的出液孔3位于针头的侧壁上。所述注射针头和注射器配套使用可完成动物颈内注射。由于针尖采用了钝圆形,不容易在颈内注射时戳破动脉管壁并造成大出血。根据动物的种类,可以选择具体的针头型号(管径的大小和侧口到针尖的距离等)。当动物为大鼠时,所述出液孔与所述针尖的距离可为5mm,-。-。采用所述针头对大鼠进行注射时,注射速度可为24G-32G。本实用新型提供的注射针头特别适用于对大鼠脑中风模型进行颈内注射,从而用于筛选治疗脑中风的药物。将本实用新型提供的针头与注射器组装后得到注射针,可对大鼠进行颈内注射,注射时可以从颈总动脉进针也可以从颈外动脉进针,针头前端抵大鼠眶下裂周围骨面,从而使侧面流出的液体进入颈内动脉入颅分支支配的区域。
ECA代表颈外动脉,ICA代表颈内动脉,CCA代表颈总动脉。[0020]颈总动脉进针的方法如下(参见图2B):①结扎颈总动脉和颈外动脉的近心端;②在颈内动脉的近分叉处放置预留线后,用动脉夹暂时阻断颈内动脉的血流(来自willis环);③在颈总动脉的远心端用剪刀或者尖头针插一小孔,然后应用注射针插入一直进针直到动脉夹处,此时,将预留线打一活结防止出血;④移除小动脉夹,继续进针,直到有一定的阻力,其前端抵眶下裂周围骨面,此时可以推注射器将药物注入。颈外动脉进针的方法如下(参见图2A):①结扎颈外动脉的远心端;②在颈内动脉的近分叉处放置预留线后,用动脉夹暂时阻断颈内动脉的血流(来自willis环);③动脉夹暂时阻断颈总动脉的血流;此时,将颈外动脉的近心端剪断;④在颈外动脉的残端进针,直到有一定的阻力,其前端抵眶下裂周围骨面,此时可以推注射器将药物注入。注射针的具体应用如下:一、大鼠MCAO模型的制作大鼠MCAO模型的制作(局灶性脑缺血再灌注模型):以10%水合***醛将大鼠进行腹腔麻醉(),颈正中切口,暴露颈总动脉、颈外动脉及翼腭动脉。大鼠通过左侧CCA切口处插入栓线(栓线购自北京沙东生物技术有限公司,#2634),翼腭动脉短暂夹闭以防误插,栓线长度自CCA分叉处约1820mm。栓塞左侧大脑中动脉,然后缝合皮肤。缺血达到2h后小心抽出栓线,即形成再灌注。在缺血期间及再灌注后
2h保持体温在(37±)°C。模型成功的标志为以大鼠手术麻醉清醒后出现右侧肢体瘫痪,站立不稳,提尾时向一侧转圈为模型成功的判断标准。二、颈内注射蓝墨水示踪将步骤一得到的模型大鼠分别采用两种方式注射纯蓝墨水:1、结扎颈内动脉的入颅分支:结扎颈总动脉和颈外动脉的近心端;分离翼腭动脉和颈内动脉后,将颈内动脉结扎,使纯蓝墨水注入翼腭动脉分支,照片见图3A。从结果可以看出,翼腭动脉的血流供应主要为眼眶,鼻腔和部分口腔结构,另有一个小的分支脑膜中动脉入颅,供应脑膜的血流,但并不支配大脑的血流。2、应用注射针堵塞翼腭动脉分支:结扎颈总动脉和颈外动脉的近心端;在颈内动脉与颈外动脉的分叉处放置预留线后,用动脉夹暂时阻断颈内动脉的血流(来自willis环);在颈总动脉的远心端用剪刀或者尖头针插一小孔,然后应用注射针插入一直进针直到动脉夹处,此时,将预留线打活结防止出血;移除小动脉夹,继续进针,直到有一定的阻力,其前端抵眶下裂周围骨面,此时可以推注射器将纯蓝墨水注入,照片见图3B。通过上述两种方法比较发现,本实用新型提供的注射针能将翼腭动脉暂时封闭,使墨水定向注入大脑内。三、颈内注射MSCs的细胞示踪l、MSCs细胞的Dil染色[0040]将MSCs细胞米用突光染料DiL(1,I’-dioctadecyl-3,3,3’,3’-tetramethyIindocarbocyanineperchlorate)进行标记,使用时
IOml培养基加40-50微升染液(lmg/ml),在培养箱中染色15分钟,PBS洗3次,每次5分钟。于荧光显微镜(X10)下观察细胞存活情况结果见图5A和图4B(图4A为红色荧光,图4B为白光)。2、%%EDTA消化后,应用从颈总动脉进针的途径进行颈内注射。3、移植细胞在脑内存活情况将移植MSCs的MCAO模型大鼠分别于14天后处死,断头取脑,去除额极部分,-20°C预冻15min,将大脑连续切成2mm厚的片状。取前端第二片4%的多聚甲醛固定,以OCT包埋,作水平横断面的连续冰冻切片,厚度为10μm,连切5片。附于多聚赖氨酸包被的载玻片上,切片表面滴加适量90%甘油PBS缓冲液,盖玻片封片。于荧光显微镜(X20)下观察细胞存活情况,拍照保存,结果见图4C-E(图4C为脑组织的细胞核,图4D为进入脑内的MSCs,图4E为图4C和图4D的合并图像)。从该结果中可以看出,该注射针能够有效的将细胞注入大脑内。
,它包括注射器针头的本体(1),其特征在于:所述针头的针尖(2)呈钝圆形且没有开口,所述针头的出液孔(3)位于针头本体的侧壁上。
,其特征在于:所述出液孔(3)距离所述针尖(2)的距离为5mm。
,其特征在于:所述针头的本体(I)-。
,其特征在于:所述针头的本体(I)-。
,由注射器和注射针头组成;所述注射针头安装于所述注射器的出液口;所述注射针头为权利要求1至4中任一所述的注射针头。
专利摘要本实用新型公开了一种用于动物颈内注射的针头。本实用新型提供的注射针头包括注射器针头的本体(1),其特征在于所述针头的针尖(2)呈钝圆形且没有开口,所述针头的出液孔(3)位于针头本体的侧壁上。由于针尖采用了钝圆形,不容易在颈内注射时戳破动脉管壁并造成大出血。本实用新型还保护一种注射针,由注射器和所述注射针头组成;所述注射针头安装于所述注射器的出液口。采用本实用新型提供的针头进行大鼠颈内注射,可以使药物专向进入大鼠颈内动脉的颅内分支,与现有的大鼠颈内注射方法相比,操作简单、易于掌握、更重要的是不需要结扎翼腭动脉,避免了分离该血管对周围神经的影响以及再灌注的影响。