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(优选)枯草杆菌摇瓶发酵生产淀粉酶
二、实验原理
酶可由动物(如胰蛋白酶、胃蛋白酶)、植物(如木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶)和微生物(细菌、霉菌、酵母)产生,其中工业酶制剂大多数由微生物发酵法生产。
由于微生物世代时间短,繁殖快、容易培养和管理,可大规模工业化生产,所以工业酶制剂大多由微生物发酵产生。
产酶微生物的获得:
1、从有关菌种保藏机构购买
2、从自然界分离筛选
产酶微生物的分离筛选方法
1)样品的采集:从富含酶作用底物的场所采集样品。
2)富集培养:投其所好,取其所抗。
3)分离获得纯培养(pureculture)的微生物。
4)初筛:选出产酶菌种,以多为主。
5)复筛:选出产酶水平相对较高的菌株,以质为主。
产酶工艺条件及其调节控制
保藏细胞
细胞活化
细胞扩大培养
发酵产酶
分离纯化
酶
固定化细胞
原生质体
固定化原生质体
培养基
预培养
无菌空气
酶制剂的发酵生产过程图解
30升全自动发酵罐
外观:棕褐色液体
1,求得测试酶液的浓度。
扩大培养多采用摇瓶培养,即在锥形瓶中加入一定量的液体培养基,在摇床上以一定转速摇动进行恒温培养。
2、仪器耗材:恒温培养箱、冰箱、高压灭菌锅、无菌操作台、摇床、托盘天平、分析天平、电炉、白色搪瓷杯、三角瓶、量筒、纱布、绳子、pH试纸、玻棒等。
稀碘液:吸取原碘液2.
(优选)枯草杆菌摇瓶发酵生产淀粉酶
23g磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)和8.
酶的提取与分离纯化的工艺流程
用途:耐高温α-淀粉酶具有极好的耐热性,能广泛应用于淀粉、酒精、啤酒、味精、酿造、纺织退浆等工业上。
酶活力:20000u/ml。
(3)在一定的条件下,将一定量的酶液和底物溶液混合均匀,适时记下反应开始的时间。
5mL稀释好的待测酶液,立即计时,摇匀,准确反应5min;
0条件下,1小时液化可溶性淀粉的克数。
外观:棕褐色液体
酶活力:样品中酶总共有多少个酶单位。
可溶性淀粉溶液(20g/L):称取2.
2)富集培养:投其所好,取其所抗。
可用以比较每单位质量酶蛋白的催化能力。
磷酸缓冲液(pH=6.
1、将酶与反应底物混合均匀,在一定条件下反应一段时间;
发酵工艺参数的控制
pH的调节控制
温度的调节控制
溶解氧的调节控制
泡沫的控制
染菌的控制