文档介绍：番茄红素和β-胡萝卜素提取
实验五:从番茄酱中提取番茄红素和
胡萝卜素
实验目的:
1. 学****从固体中萃取有机化合物的方法
2. 学****用薄层层析法检验有机化合物的基本原理,点样,展开和计算Rf值的方法天然产物中有机成分的提取方法:
1. 浸取法:选用合适的溶剂,根据相似相溶原理,直接把溶剂加到固体样本上加热回流提取。平时熬制中药也是采用此法。用水煮中药就是把中药的有效成分提取出来。
2. 水蒸气蒸馏法:天然动植物中含有一些较易挥发的成分,利用水蒸气可以把这些物质蒸馏提取出来。天然的很多香料(如橙油)的提取就是使用此法。
3. 连续提取法: 原理同第一种方法,但是使用了一种特殊的装臵——索氏提取器。使用少量的溶剂就能来重复浸取以达到浓缩提取的目的。如茶叶中咖啡因的提取就是用此方法。
加热回流装置
本实验中薄板层析中的爬板
●色谱法包括薄层法、柱色谱、纸色谱、气相色谱和液相色谱,本学期只做薄层色谱。●色谱法是分离鉴定有机化合物的常用方法。
●原理:利用混合物各组分在固定相和流动相的溶解度的不同,即
在两相间中,分配系数的不同而使各组分分开。
●特点:时间短,分离效果好,需要样品量少。适用于在较高温度下容易发生化学变化的化合物。
1. 薄层色谱法
事先准备:用铅笔和尺子轻轻画出起始线和终止线;
点样:用直径1mm的平头毛细管点取提取物,先在废纸上点一下(快速),然后在起始
线少量多次的点样(保证一定的浓度,一般需要50次以上)。待溶剂挥发以后,轻放到装好展开剂的展缸内,不要让展开剂溅起或倾斜。
展开(爬板):当展开剂爬到终止线时,停止爬行,取出。因为β胡萝卜素(黄点)易
挥发,所以要尽快画出黄点的位臵;
Rf值的计算:~。
意义:定性鉴定,检测化学反应等等。
点样:在薄板一端10mm(下)及另一端5mm(上)处用铅笔轻轻划一道痕迹,用直径小
于1mm的毛细管(平口)点样,点样时样点一定要小,可重复在一点上点几次,使样品点小而又有一定的浓度,一块板上可以点两点;
展开剂的选择:根据样品点的极性而定,极性大的化合物可选用极性较大的展开剂。为
达到较好的分离效果,可以选用混合溶剂。做多次展开后可确定一合适的配比。展开时,至溶剂前沿离板顶5mm停止。
显示方法:A)有色化合物可以直接观察;B)无色的,用显色剂显色,如碘熏法、紫外
线显色,用硅胶GF254,有样品点的位臵在紫外线照射下发暗。
Rf值计算公式:Rf=溶剂的最高浓度中心÷溶剂前沿至原点的中心距离。
注意事项
? 本次试验使用95%乙醇和石油醚提取。两种混合后要用NaCL溶液洗涤。***主要进入水相,建议水相不要弃去。点样时在一块板上点两点:一为水相,一为有机相。观察比较有何不同。
? 展开剂的配比一定要控制为石油醚:***=9:。同时可以做一个比较,采用12:1。在混合展开剂中***的极大性大于石油醚,因此采用***含量增大,极性增大,使得分离效果很差。如果增加石油醚的含量,使得展开剂的极性变小分离效果好。
? 观察:如果红点紧追黄点,且Rf>,则要增加石油醚的配比,如12:1. 注意事项(II)
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