文档介绍：转铁蛋白说明书
牛转铁蛋白(饱和铁形态,冻干粉末,细胞培养级别)
Transferrin, Bovine Holo Form, Powder
Iron Rich, Cell Culture Grade
产品介绍:
转铁蛋白是血浆中主要的铁传递蛋白,为细胞内化和细胞代谢提供所需的铁。研究发现所有的细胞生长都离不开转铁蛋白。不但维持正常的细胞代谢依赖于以生物活性形态存在的铁,铁还是一些酶的辅助因子,比如RNA聚合酶,DNA合成酶。同时也是血红蛋白的重要组成部分。
转铁蛋白是血浆糖蛋白,从血浆中分离而来,牛转铁蛋白以两种分子形态存在,分子量分别为74KD和78KD。每个转铁蛋白分子通过C端和N端结构位点可以结合两分子铁离子,所以转铁蛋白以三种形态存在:脱铁(不结合铁离子),饱和铁(结合两分子铁离子)和部分饱和,在生理情况下,转铁蛋白分子仅有 1/3 被铁饱和。
使用说明:
转铁蛋白对于绝大部分细胞系在无血清培养基中生长是必需的,研究表明饱和铁形态的转铁蛋白对于促进细胞生长是最有效的形态。对于杂交瘤,黏连细胞和悬浮细胞系,在细胞培养过程中,-100μg/ml。针对不同的细胞系,需要选择最合适的浓度。
【】,以碳14标记的胸苷利用度为指标,
比较了鼠源、人源和牛源Tf的效果。结果显示,无论在刀豆蛋白A或者脂多糖的刺激条件下,三种来源的Tf均能显著增加小鼠淋巴细胞对胸苷的利用度,三种Tf之间的差异不显著。
Larisa Tsavaler等在人红白血病体外细胞系K562的无血清培养试验中【2】,比较了人源转
铁蛋白和牛源转铁蛋白的效果,结果显示两者在300ug/ml的浓度条件下,均能良好支持细胞生长,无显著差异。
【】Robert C Penhallow等研究了Hela细胞无血清培养基中Tf的效果3,结果显示牛源Tf
与人类细胞表面的Tf受体亲和力较弱,在无血清Hela细胞培养生长试验中,牛源Tf与人源Tf一样能够支持细胞生长,但需要的浓度要较高。
转铁蛋白冻干粉需要保存在冷藏状态下,使用之前再溶解。一般用PBS或者其它合适的溶剂在室温下将转铁蛋白冻干粉溶解成储液,-,然后用无菌滤膜进行过滤,滤液可在无菌条件下2-8℃保存30天。
质量控制:
产品质量从源头开始控制,牛血浆从正规农场定制,进行正规的检验检疫。经过多步色谱纯化得到的转铁蛋白,需进行60℃,10h的病毒灭活,。产品最后要进行包括纯度,内***,酸碱度,铁含量,水分,微生物限度等检查,以确保产品符合细胞培养要求。
附图1、转铁蛋白的扫描图谱
附图2、转铁蛋白SDS-PAGE图谱
1为marker,2为转铁蛋白
参考文献
1、J. H. Brock。The effect of iron and transferrin on the respon