文档介绍：还原糖测定
费林氏液法
仪器和用具
古氏坩埚:25 ml;
抽滤瓶:500 ml;
真空泵或水泵等。
试剂
费林氏溶液;
a. 碱性酒石酸铜甲液: g,加适量水溶解, ml,再加水至 500 ml,用精制石棉过滤;
b. 碱性酒石酸铜乙液:取酒石酸钾钠173 g与氢氧化钠50 g,加适量水溶解,稀释至500 ml,用精制石棉过滤,贮存于具有橡皮塞的玻璃瓶内。
精制石棉:先用3 N盐酸将石棉浸泡2~3日后,用水洗净。再加10%氢氧化钠溶液浸泡2~3日,倾去溶液,用热碱性酒石酸铜乙液浸泡数小时,用水洗净。再以3 N盐酸浸泡数小时,用水洗至不呈酸性,使之成为微细的软纤维,用水浸泡贮存于玻璃瓶内,作填充古氏坩埚用。
N高锰酸钾标准溶液。
1 N氢氧化钠溶液:取氢氧化钠4 g,加水溶解至100 ml。
硫酸铁溶液:取硫酸铁50 g,加水200 ml溶解后,慢慢加入硫酸
100 ml,冷后加水至1000 ml。
3 N盐酸:取盐酸25 ml,加水至100 ml。
操作方法
表 1
试样处理:准确称取试样10~20 g放入250 ml容量瓶中,加水200 ml,在45℃水浴中加热1 h,并时时振摇,到时待冷后加水至刻度,静置后,吸取澄清液200 ml于另一250 ml容量瓶中,加碱性酒石酸铜甲液10 ml和1 N氢氧化钠溶液4 ml,摇匀,加水至刻度,静置30 min,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,其余滤液供测定还原糖和非还原糖用。
滴定:精密吸取制备的试样溶液50 ml于400 ml烧杯中,加入碱性酒石酸铜甲、乙液各25 ml,盖一表面皿,置电炉上加热,在4 min内沸腾,再煮沸2 min,趁热用铺有石棉的古氏坩埚(或垂融坩埚)抽滤,并用60℃热水洗涤烧杯和沉淀,至洗液不呈碱性为止。将古氏坩埚放回原400 ml烧杯中,加硫酸铁溶液25 ml和水25 ml,用玻棒搅拌,使氧化亚铜完全溶解, N高锰酸钾标准溶液滴定至微红色。同时取水50 ml,加碱性酒石酸铜甲、乙液各25 ml,做试剂空白试验。
结果计算
相当于试样中还原糖重量的氧化亚铜重量按公式(2)计算:
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(2) x=(V-V0)N×
式中:x──相当于试样中还原糖重量的氧化亚铜的重量,mg;
试样消耗高锰酸钾标准溶液的体积,ml; V──
试样空白消耗高锰酸钾标准溶液的体积,ml; V0──
高锰酸钾标准溶液的当量浓度; N──
1 N高锰酸钾标准溶液1 ml相当于氧化亚铜的毫克数。 ──
由所得的氧化亚铜重量,按附录A的表查出相当的还原糖(以葡萄糖计)的重量。
还原糖干基含量按公式(3)计算:
……………………………………………………
(3)
式中:A──由附录A表中查得的还原糖(以葡萄糖计)的重量,mg;
试样重量,g; W──
试