文档介绍：选修三知识点填空
第一章基因工程
第一节基因工程概述
(一)“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(简称限制酶) 1
:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
:经限制酶切割产生的DN***段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。
(二)“分子针线”——DNA连接酶
:根据酶的来源不同,可分为E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶两类
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★两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较:
①相同点:都缝合磷酸二酯键②区别:,只能使黏性末端之间连接;T4DNA
:①能在受体细胞中并;
②具有一至多个,供外源DN***段插入;
③具有,供重组DNA的鉴定和选择。
: 、和等最早应用的载体是,它是双链 DNA分子。
(一) 获得目的基因(目的基因的获取)
:①从自然界中已有的物种中分离出来,如可从基因文库中获取。
②用人工的方法合成。
★获得原核细胞的目的基因可采取,获取真核细胞的目的基因一般是。★人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。
(1)PCR的含义:是一项在生物体外复制特定DN***段的核酸合成技术。
(2)目的:获取大量的目的基因
(3)原理:
(4)过程:第一步:加热至90~95℃第二步:冷却到55~60℃,第三步:加热至70~75℃,
(5)特点:指数形式扩增
(二) 制备重组DNA分子(基因表达载体的构建)
:除了目的基因外,还必须有
★标记基因的作用:鉴定受体细胞中是否含有,从而将筛选出来。
: 限制酶分别切割载体和目的基因,再用把两者连接。
(三) 转化受体细胞(将目的基因导入受体细胞)
:是进入受体细胞内,并且在受体细胞内和的过程。
:
①将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是介导转化技术( 转化法),其
次还有介导转化技术( 法)和技术( 法)。
②将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是技术。此方法受体细胞多
是。
③将目的基因导入微生物细胞: 法。
(四) 筛选出获得目的基因的受体细胞、培养受体细胞并诱导目的基因的表达(目的基因的检测与鉴定)
,方法是采用技术。
,方法是采用技术。
,方法是采用技术。
。如抗虫或抗病的鉴定等。
由于基因工程是在平上进行操作,因此又叫做。
答案:一、分子水平剪切→拼接→导入→表达 DNA分子重组
DNA技术二限制性核酸内切酶(简称限制酶)1. 原核生物2. 特定特定磷酸二酯键3 黏性末端平末端。(二) DNA连接酶双链单链要模板 2个DN***段单个脱氧核苷酸加到已存在的单链DN ***段上形成磷酸二酯键三)载体复制稳定保存②限制酶切割位点
2. 质粒、噬菌体和动、植物病毒。质粒, 环状直接分离, 人工合成。:DNA双链复制 DNA解链为单链; 引物与两条单链DNA结合;热稳定DNA聚合酶从引物起始进行互补链的合成。标记基因。目的基因,(基因枪花粉管通道(花粉管通道法)。+显微注射受精卵。 Ca处理插入了目的基因, DNA分子杂交2 转录出mRNA,分子杂交翻译成蛋白质, 抗原—抗体杂交4. 个体生物学水平
第二节基因工程的应用
:能打破常规育种难以突破
的。
(1)植物基因工程:抗、抗、抗转基因植物,利用转基因改良植物的品质。
(2)动物基因工程:提高动物生长速度来提高产品改善产品,用转基因动物生
产,用转基因动物作器官移植的等。
(3)基因诊断和基因治疗:
基因诊断:又称为DNA诊断,是采用的方法来判断患者是否出现了基因异常或携
带病原体。
基因治疗:指利用置换或弥补缺陷基因的治疗方法。实例:ADA基因缺陷症的
基因治疗
第三节蛋白质工程
:根据蛋白质的蛋白质,甚至创造自然界不存在的、具有优良特性的蛋白质。
预期蛋白质功能→测定蛋白质三维空间结构→推测应有的序列→找到对应的序列(基